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洛阳土种鸡IL-2 cDNA的克隆及原核表达
【作者】 张春杰； 李银聚； 程相朝； 吴庭才； 王臣； 郑祥海；
【机构】 河南科技大学动物科技学院；
【摘要】 应用RT-PCR技术从新城疫I系疫苗诱导的洛阳土种鸡胚脾淋巴细胞中扩增到全长0.43kb的鸡IL-2基因cDNA,将IL-2cDNA克隆到PMD-T载体,测序结果表明,该基因为不含终止密码子的目的基因。将该目的基因克隆到原核表达载体PET-28a,获得的重组质粒PET-28a-IL2经酶切、PCR及序列测定,表明IL-2基因插入的位点、大小与读码框架均正确。PET-28a-IL2在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE电泳分析,在14KD处出现一条约占总蛋白21%的蛋白带,表明所克隆的IL-2基因在大肠杆菌中得到良好的表达,为进一步研究IL-2的生物学特性奠定了基础。
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
- 【会议时间】2005-09-24
- 【会议地点】中国四川雅安
- 【分类号】S831
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会、四川农业大学