CpG对猪鸡免疫增强作用的初步研究

【作者】 王金宝； 任慧英； 李俊； 周顺；

【机构】 山东省农业科学院； 莱阳农学院；

【摘要】 对不同CpG序列在猪群、鸡群中的免疫佐剂作用进行了研究。设计并合成了16种含不同CpG基序的DNA序列,与新城疫IV系疫苗联合对14日龄的罗曼雏鸡进行了免疫研究,免疫剂量为每只鸡20ug。分别于免疫前、免疫后的7、14、21d采血,检测NDV的HI抗体水平、淋巴细胞增殖反应、血液中的T淋巴细胞比例,并在免疫后21d对各免疫组的免疫器官进行了组织学检测。通过对各项指标的综合比较,初步筛选了4个免疫佐剂作用较强的CpG序列,并经SPF鸡的重复试验验证并确定了3个对鸡免疫增强作用明显的CpG序列,分别是AACGTTAACGTT、AACGTCAACGTC、AGCGTCAGCGTC,将其中一个序列通过分子生物学手段插入pMD18-T原核载体中,并经质粒大抽提获得了重组的CpG-DNA。将含CpG的质粒与NDV疫苗联合免疫SPF鸡,对鸡群的体液免疫指标和细胞免疫指标进行了检测。另外,用相似的方法筛选了对猪有较强免疫增强作用的CpG序列GACGTTGACGTT,并插入了pMD18-T原核载体中,将重组的CpG序列与猪瘟疫苗进行了联合免疫研究。在此基础上,将经过猪体试验筛选出的CpG序列插入了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3和GP5的真核双表达载体pIRES-ORF3ORF5的骨架区,对含CpG序列的PRRSV的核酸疫苗的免疫作用进行了研究。更多还原