原位PCR检测基因枪轰击和肌肉注射PRRSV ORF5基因疫苗在BALB/c小鼠体内动态分布规律研究

【作者】 豆文波； 程安春； 汪铭书； 希尼尼根； 陈希文； 刘菲； 陈孝跃；

【机构】 四川农业大学动物科技学院； 动物疾病与人类健康四川省重点实验室； 内蒙古农业大学动物科学与动物医学学院；

【摘要】 将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别用6μg基因枪轰击和200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg、50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间取免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑等组织器官,多聚甲醛固定,石蜡包埋。用原位PCR检测基因枪轰击和肌肉注射免疫后不同时间PRRSVORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5在BALB/c小鼠不同组织中的分布情况,检测结果如下:免疫后3h就在基因枪轰击组和肌肉注射各组BALB/c小鼠的免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑中均检测到强阳性杂交信号;佐剂组各组织检测到的阳性杂交信号在强度和存留时间上都强与同剂量肌肉注射组;基因枪组轰击组虽然导入疫苗剂量较少,但是仍然在小鼠各组织中保留很长时间;肌肉注射组肌肉注射基因疫苗剂量越大,基因疫苗在被免疫的BALB/c小鼠组织中保留时间越长。以上结果表明:肌肉注射基因疫苗剂量与基因疫苗在组织中存留时间呈现正相关关系;基因枪轰击和肌肉注射都是PRRSVORF5基因疫苗良好的免疫途径;佐剂对疫苗的存留有正协同作用。更多还原