中暑小鼠血清及热打击对人脐静脉内皮细胞表达炎症因子表达的影响

【作者】 刘亚楠； 徐秋林； 郭晓华； 黄巧冰； 苏磊；

【机构】 广州军区广州总医院重症医学科； 南方医科大学；

【摘要】 目的研究中暑小鼠血清及热打击对原代培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)炎症因子表达的影响及其机制。方法分离人脐静脉内皮细胞HUVECs,光镜下观察细胞形态并对其染VE-Cadherin及Ⅷ因子进行鉴定。分别给予43℃1h热打击(热打击组)或中暑小鼠血清刺激(血清刺激组),24h后分别提取总RNA,荧光定量PCR检测TNF-α、IL-6及IL-1β的mRNA表达水平,western blot检测P65表达水平,提取胞浆及胞核蛋白检测其核转位情况。结果所分离HUVECs纯度较高,光镜下细胞呈特征性鹅卵石形状排列,VE-Cadherin及Ⅷ因子均可染色。与正常对照组相比,给予43℃1h的热打击24h后,TNF-α、IL-6及IL-1β的mRNA水平表达降低(P<0.05),NF-ΚΒP65表达水平降低,P65并未在核内累积;而给予10%中暑小鼠血清刺激24h后TNF-α、IL-6及IL-1β的mRNA水平表达增加(P<0.01),NF-ΚΒP65表达未发生明显变化,但其核转位增加。结论热打击并未使HUVECs炎症因子表达增加,而给予中暑小鼠血清刺激后NF-ΚΒ发生活化,其炎症因子表达显著上调,是中暑相关全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)重要机制。更多还原