山东省苹果轮纹病菌多样性研究

【作者】 修建冰； 徐静伟； 陈亮； 何邦令； 刘会香；

【机构】 山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心；

【摘要】 山东省是我国北方苹果主产区之一,近年来苹果轮纹病已严重影响苹果的产量,成为苹果产业发展的障碍。随着苹果栽植方式的改进,苹果轮纹病呈现出多样性。为了解山东省苹果轮纹病菌的多样性,本研究通过对山东省苹果主产区苹果轮纹病菌进行广泛采集和分离,通过对病菌培养学、形态学、ITS序列分析和系统发育树构建,以期明确山东省苹果轮纹病菌的多样性,为病害的防控提供理论依据。本研究以烟台、青岛、日照、威海、潍坊、东营、滨州、枣庄、济宁、泰安、聊城、济南、临沂等13地市的65株苹果轮纹病菌为供试材料,观察各菌株不同时期的培养学和形态学特征,用改良的CTAB法提取其基因组DNA,利用通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增,测序并构建系统发育树。结果发现,在25℃下观察,可将供试菌株初步分为8个类群,菌株产生的色素多为墨绿色,部分菌株出现褐色或灰黑色色素;形态学观察表明,子实体为球形、扁球形或不规则形,半埋生,少数菌株表生,子实体少单生,多聚生,分生孢子器单生或聚生在一个大型子座内,少量分生孢子器和子囊腔混生,其内产生分生孢子和子囊孢子,部分菌株产生小孢子,且与分生孢子或子囊孢子混生;对65个供试菌株的序列进行初步系统发育分析,发现供试菌株可分为两个类群,类群一菌株共43个,以99%的支持率聚在一起,13地市均有分布;类群二菌株共21个,其中烟台莱州的1个菌株单独分出,其余20个菌株以96%的支持率聚在一起,分别为烟台、威海和日照地区的部分菌株,说明Botryosphaeria dothidea为山东省苹果轮纹病的主要致病菌,而且苹果轮纹病菌存在种内多样性,但与其地理分布无关,类群二的21个菌株因菌株分子变异较大,尚需继续验证,可能存在新种,新发现的小孢子尚需深入研究,以确定其在生殖发育过程中的功能。更多还原