烟草野火病病原特性、快速检测及防治药剂筛选的研究

【作者】 张世珖； 刘雅婷； 彭润； 徐玲； 姬广海； 王绍坤； 李永忠； 罗佑珍；

【机构】 云南农业大学植保学院； 云南农业大学农学与生物技术学院； 云南烟草红云红河集团； 云南农业大学烟草学院；

【摘要】 本研究从云南昆明、玉溪、曲靖、保山、楚雄、大理、昭通等主要烟区收集到的野火病菌标样154个,经分离、纯化及生理生化测定,得到烟草野火病菌株74个。通过研究获得以下结果:(1)通过筛选致病力强的菌株作为抗原,制备了烟草野火病菌特异性的抗血清,并在国内外首次建立了一套快速检测烟草野火病菌的血清学方法(专利申请号:200910094349.5),制备了SPA-ELISA反应试剂盒,与凝集反应相结合,使检测真正做到了简便、快速、灵敏、准确。(2)应用上述方法对从田间及温室中采集的土壤、烟株根围、田间杂草、种子等进行了检测,明确云南烟草野火病的初侵染源主要为种子和根部残体,为国内首次报道。(3)筛选出了一套烟草野火病菌生理小种鉴别寄主体系,包含了高感、中感、中抗、高抗5个品种,将云南野火病菌株分为4个生理小种,属国内外首次报道。(4)在国内外率先利用RAPD和rep-PCR技术对供试菌株DNA对不同地理来源的烟草野火病菌株进行了遗传多样性分析,发现烟草野火病菌生理小种的划分结果与遗传组群之间有较好的对应关系。(5)研究了烟草野火病菌毒素的特性,在国内外首次报道了烟草野火病毒素对烟草叶片组织超微结构的影响,发现该毒素导致叶绿体内膜系统的破坏,基粒片层解体,叶绿体形成泡囊;淀粉粒增多并膨大;细胞壁扭曲变形或断裂。并从多方面来评价了烟草野火病菌毒素的致病性。(6)通过对24个不同烟草品种及两个野生种黄花烟和长花烟进行抗病性鉴定分析,发现不同抗性品种对不同生理小种的抗性反应差异显著,根据接种后不同烟草品种的形成的病斑直径,将其划分为4个等级:高抗、中抗、中感、高感。两个野生种黄花烟和长花烟均表现为高抗,可以作为烟草野火病抗性育种优先利用的种质资源。(7)选用不同药剂对烟草野火病菌进行抑菌试验,筛选出2种效果较好的药剂,即新植霉素和农用链霉素。同时,发现云南部分地区的烟草野火病菌对农用链霉素具有抗药性。(8)从多种植株根际土壤中和烟草叶面分离到188个细菌分离物,室内抑菌圈法测定和温室防效试验筛选获得了对烟草野火病病菌具有抑菌谱广,定殖性能强,田间防病效果好的属于溶杆菌属Lysobacter sp.的生防菌株6株,并已在Genebank上提交了它们的16SrRNA序列。更多还原