Tenascin-C在坐骨神经损伤近侧端的表达变化和功能研究

【作者】 张占虎； 于彬； 王勇军； 顾芸； 顾晓松；

【机构】 南通大学神经再生重点实验室；

【摘要】 目的 Tenascin-C(TNC)是由单基因编码的细胞外基质大分子糖蛋白,其具有复杂的分子结构,且六个TNC分子可以通过氨基端的二硫键连接成为六臂体结构。TNC在体内的表达是暂时性的,一般高度集中于胚胎发育时期。然而在成体的某些组织中,伴随着肿瘤发生和创伤恢复等某些病理过程,TNC还会在相应的组织再度出现大量表达。然而,对于周围神经再生这一过程,TNC所参与的功能至今尚未明确。本研究的目的是分析大鼠坐骨神经损伤后再生过程中TNC的表达位置和表达趋势,并且在体外水平初步研究TNC在周围神经系统中的功能。方法制备大鼠坐骨神经损伤模型,采用冰冻切片和免疫荧光染色检测神经缺损0天(对照组),4天(实验组)损伤近端神经组织TNC的表达变化及表达位置;并在体外将转染过TNC siRNA的成纤维细胞与施万细胞共培养,之后对共培养体系中的施万细胞进行细胞划痕实验。结果免疫荧光染色发现TNC在损伤后4d处于高表达状态,并在神经外膜处与波形蛋白(Vimentin)可以共定位;体外细胞共培养实验发现使用siRNA干扰成纤维细胞中的TNC可以导致与之共培养的施万细胞划痕愈合速度变慢。结论坐骨神经中的成纤维细胞可以在神经损伤后的近端神经表达TNC,并且相对于正常水平表达大幅上调,提示了TNC在神经再生过程中的重要作用,进一步的体外实验发现成纤维细胞所产生的TNC具有促进施万细胞的迁移的作用。更多还原