骨髓间充质干细胞向神经细胞分化中相关基因DNA甲基化状态的研究

【作者】 鄢文海； 张英； 段萍； 韩雪飞； 刘素芳； 许燕； 邢莹；

【机构】 郑州大学干细胞研究中心； 郑州大学病理生理学教研室； 郑州大学生理学教研室；

【摘要】 目的检测骨髓间充质干细胞(MSC)向神经细胞分化前后和脑组织中转录因子OCT4、微管相关蛋白TAU和神经特异性烯醇化酶NES基因启动子区甲基化状态,探讨DNA基化调控在MSC向神经细胞分化中的作用。方法体外分离培养大鼠骨髓MSC,用BHA/DMSO诱导第四代MSC向神经细胞分化,光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测TAU和NSE表达,甲基化特异性PCR(MSP)测序法检测MSC、MSC分化神经细胞和脑组织三组的Oct4、Tau和NSE启动子区甲基化状态。结果 MSC诱导分化后呈现神经细胞样形态,NSE和TAU染色阳性。MSC、MSC分化神经细胞和脑组织的Oct4启动子区甲基化修饰百分比77.8%、87.5%和78.6%,各组之间无明显差异。Oct4启动子区-123 bp的CpG在MSC维持低甲基化状态(11.1%),明显低于脑组织(71.4%)和MSC分化神经细胞(50.0%)。Tau和NSE启动子区在MSC分化前后和脑组织中均保持未甲基化状态,组间无差异。结论 MSC向神经细胞前后Tau和NSE基因呈去甲基化状态,而Dct4基因甲基化增强。更多还原