PI3K/AKT通路在KA损伤大鼠海马细胞凋亡中的作用

【作者】 方金林； 徐群渊； 段德义；

【机构】 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室,教育部神经变性病重点实验室；

【摘要】 目的研究PI3K/AKT信号通路在海人酸(KA)损伤SD大鼠海马神经细胞凋亡中的相关作用。方法成年SD大鼠,侧脑室注射KA 1.0μg,术后选取5个时间点(8 h,16 h,1 d,3 d,5 d)通过免疫组化利Westernblot等方法观察相关指标(AKT,P-AKT,mTOR,p-mTOR,bcl-2,bax,caspase 3,VEGF,Hif-1 a)的改变,对照组注射生理盐水观察同样指标。结果尼氏染色显示海马CA3区锥体细胞8 h时即开始有死亡,3 d时累及CA1区,5 d时可累及整个锥体细胞层。Western blot结果表明AKT在KA损伤大鼠海马内8 h有激活,5 d达最高,bcl-2 8 h,16 h表达增加,1 d,3 d,5 d有所减弱;bax于3 d时表达最强,5 d时有所减弱;VEGF 16 h、1 d表达增加,5 d有所减弱。免疫组化显示Caspase-3于1 d、3 d时表达增加。对照组AKT无激活,bcl-2、bax、VEGF水平无变化,锥体细胞无损伤。结论 KA损伤SD大鼠海马组织中bcl-2和VEGF等抗凋亡蛋白早期即升高,但凋亡成分bax和Caspase-3蛋白随之明显升高,最终导致细胞发生凋亡。更多还原