蛋白激酶C epsilon介导低氧预适应对小鼠缺血性脑的保护作用

【作者】 杜建丽； 梁婧； 封素娟； 刘旭； 张彩艳； 张楠； 卜祥宁； 李俊发；

【机构】 首都医科大学神经生物学系 北京神经科学研究所；

【摘要】 目的脑缺血/低氧预适应(I/HPC)是一种内源性保护机制,可使组织细胞对继发严重的缺血/低氧刺激产生耐受。本研究旨在探讨低氧预适应(HPC)对小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)所致脑缺血性损伤的影响及新奇型蛋白激酶C epsilon(nPKC epsilon)在其中的作用。方法借助本室已建小鼠整体HPC模型和MCAO缺血模型,通过神经行为学评分、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、NeuN染色、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)等分子生物学技术,观察脑缺血后小鼠行为学、脑梗死面积、水肿率、神经元丢失以及缺血脑皮层组织nPKC epsilon膜转位(激活)和蛋白表达量的变化;并通过侧脑室注射nPKC epsilon特异性抑制剂epsilon V1-2,进一步探讨其在HPC发生发展过程中的作用。结果缺血后6小时,HPC明显改善小鼠缺血后神经行为学改变,降低MCAO所致皮层局灶性脑缺血梗死体积(P<0.05,n=12)、脑水肿率(P<0.05,n=12)、梗死区密度值(P<0.05,n=12)和缺血半影区神经元的丢失(P<0.05,n=6)。应用nPKC epsilon特异性抑制剂epsi-lon V1-2可减弱HPC的神经保护作用。同时,HPC可明显缓解MCAO所致缺血核心区和半影区nPKC epsilon膜转位水平的降低(P<0.05,n=6)。结论 HPC可明显减轻MCAO所致脑缺血性损伤,nPKC epsilon可能参与介导这种保护作用。更多还原