抗β淀粉样蛋白聚集化合物的体外筛选

【作者】 葛金芳； 乔金平； 甘昌胜； 潘见； 汪琛玮； 齐丛丛； 蔡莉； 周江宁；

【机构】 中国科学技术大学生命科学学院神经退行性疾病实验室； 合肥工业大学农产品生物化工教育部工程研究中心；

【摘要】 老年斑、神经元纤维缠结为阿尔茨海默病的两大重要病理特征,其生化基础均为β淀粉样蛋白(βamyloidprotein,Aβ)沉积,靶向于Aβ的治疗被认为是针对病因的治疗,而抗Aβ聚集化合物的设计与筛选则成为AD病因治疗的热点。本研究以刚果红(Congo Red)和硫磺素T(thioflavin T,ThT)为阳性对照,通过表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)首先定性筛选出具有抗Aβ聚集潜能的化合物,再通过观察不同剂量化合物与的Aβ反应了解其动力学特征。结果表明,27种待测小分子化合物中有10种显示出与纤维状Aβ1-40或纤维状Aβ1-42的结合、解离特性,但与单体Aβ1-40或单体Aβ1-42则结合能力非常小。而且在(1.56-100μM)剂量范围内,大多呈现出与剂量有关的效应变化(结合单位随剂量增加而增加),其反应能力较阳性对照化合物弱,但反应性质相似。通过硫磺素T(thioflavinT,ThT)荧光强度的变化研究筛选出的化合物RES和G1101-2对Aβ1-40或Aβ1-42自我聚集过程的干扰,结果表明,RES(50μM)和G1101-2(50μM)能减弱ThT荧光强度。由于ThT结合的是纤维状Aβ1-40/1-42,提示G1101-2干扰Aβ1-40/1-42的聚集过程。进一步采用原子力显微镜(atomicforcemicroscopy,AFM)和核磁共振成像技术(1Hnuclearmagnetic resonance,1HNMR)也证实RES(50μM)和G1101-2(50μM)具有抗Aβ聚集能力。以上结果提示,SPR可作为筛选抗Aβ聚集潜能化合物的有效方法,经SPR筛选的化合物RES和G1101-2具有明显的抗Aβ聚集作用,而且这种作用可为AFM和1HNMR结果所证实。对上述小分子化合物进行的研究,可为抗β淀粉样蛋白聚集药物的研制、没计和验证提供了实验基础和理论依据。更多还原