组胺对NMDA诱发的神经元兴奋性损伤的保护作用及其机制

【作者】 戴海斌； 沈耀； 胡薇薇； 范彦英； 陈忠；

【机构】 浙江大学医学院附属第二医院； 浙江大学医学院药理教研室；

【摘要】 目的在细胞水平探讨组胺及其受体在NMDA诱发的神经元损伤中的作用及其机制。方法采用原代新生大鼠皮层细胞培养的方法,以NMDA急性损伤为模型,观察组胺及H3受体拈抗剂对神经元的作用及机制。结果 NMDA100mM作用3小时后,神经元损伤主要以坏死为主,凋亡很少。组胺和H3受体拈抗剂clobenpropit呈浓度依赖地改善NMDA引起的神经元坏死。组胺的保护作用能被H2受体拈抗剂cimetidine所逆转,但不能被H1受体拈抗剂pyrilamine所逆转。H2受体激动剂amthamine能保护NMDA诱导的神经元损伤,这种作用能被cimetidine所逆转,但不能被pyrilamine所逆转。8-Br-cAMP能模仿组胺的保护作用,而AC抑制剂SQ-22536和PKA抑制剂H-89能阻断组胺的保护作用。进一步研究表明,NMDA能促使神经元膜上NMDA受体增加,而组胺的预处理促使NMDA受体的内化。另外,clobenpropit的保护作用能被组胺H3受体激动剂R-α-methylhistamine所逆转,但不能被pyrilamine和cimetidine所逆转。GABAA受体选择性拮抗剂bicuculline和非选择性拮抗剂picrotoxin能逆转clobenpropit的保护作用。进一步研究发现,clobenpropit预处理能引起细胞GABA的释放。而SQ-22536和H-89能逆转clobenpropit的保护作用和GABA的释放。此外,NMDA能诱导[Ca²⁺]i的增加,而clobenpropit能阻断[Ca²⁺]i的升高,R-α-methylhistamine逆转clobenpropit的阻断作用,而pyrilamine和cimetidine没有影响。结论组胺和clobenpropit能保护NMDA诱发的神经元兴奋性死亡。组胺的保护作用是通过H2受体的激活,通过cAMP/PKA通路起作用的,并且与促使NMDA受体的内化有关。Clobenpropit的保护作用是通过作用于突触前膜的H3异身受体,引起cAMP/PKA通路的激活,促进GABA的释放,间接地保护了神经元。另外,降低NMDA诱导的[Ca²⁺]i的升高作用也参与了clobenpropit保护作用。更多还原