褪黑素(Melatoin MT)对大鼠急性脊髓损伤内质网应激蛋白GADD153/CHOP表达的影响

【作者】 王冰； 王德桂； 马泽民；

【机构】 中南大学湘雅二医院脊柱外科；

【摘要】 目的观察褪黑素(melatonin,MT)对大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织内质网应激相关蛋白GADD153/CHOP表达的影响,探讨其对脊髓损伤的保护作用及机制。方法以改良Allen’s法制作SD大鼠脊髓损伤动物模型(使用10g金属棒从2.5cm高度打击大鼠T9-10)。96只SD大鼠随机分为三大组:脊髓损伤褪黑素(MT)治疗组及脊髓损伤5%乙醇处理组和生理盐水(NS)处理组。每组实验大鼠按损伤后3h、1d、3d、7d时间点以改良Tarlov评分法评价其神经功能,并获取损伤节段脊髓组织标本,以免疫组化法检测CHOP表达及TUNEL方法检测细胞凋亡及细胞凋亡指数(AI)。结果 MT组与乙醇组、NS组不同时间点Tarlov评分依次分别为:3h:2.82±0.12、2.68±0.21和2.71±0.17;1d:2.68±0.06、2.58±0.06和2.52±0.19;3d:2.60±0.37、2.37±0.11和2.38±0.12;7d:3.51±0.08、2.85±0.04和2.80±0.10;MT组与乙醇处理组、NS处理组比较,除3h时间点外,其他各个时间点MT组大鼠Tarlov评分明显高于乙醇处理组、NS处理组,且有统计学差异(p<0.05)。CHOP在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,MT组与乙醇组、NS组除3小时时间点CHOP表达差异无统计学意义外,其他各时间点CHOP表达明显低于乙醇、NS组,且有统计学意义(p<0.05)。MT组内,3h组和1d组、3d组、7d组各组CHOP表达差异均有统计学意义(p<0.05),且CHOP表达呈现3h<1d<3d>7d之特点。TUNEL方法检测细胞凋亡发现MT组和乙醇组、NS组3h即出现细胞凋亡,三组均于3d达到凋亡高峰,7d凋亡下降,三组除3h时间点细胞凋亡指数差异无统计学意义外,其他各时间点MT组细胞凋亡指数明显低于乙醇组、NS组,且有统计学意义(P<0.05)。MT组内各时间点的细胞凋亡指数差异有统计学意义(p<0.05),且细胞凋亡指数亦呈现3h<1d<3d>7d之特点。结论 MT可以改善急性脊髓损伤的神经功能障碍,这与其抑制CHOP表达及脊髓细胞凋亡有关,而其对损伤脊髓的修复具有时效性。更多还原