携带瞬时受体蛋白通道C5的细胞外囊泡在临床判断乳腺癌化疗耐药中的价值

【作者】 华东； 吴小红； 王腾； 汪林军；

【机构】 无锡市第四人民医院肿瘤内科；

【摘要】 目的:探讨细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)及所携带的携带携带瞬时受体蛋白通道C5(transient receptor potential channel 5,TRPC5)对判断乳腺癌临床化疗多药耐药发生的价值。方法:阿霉素(ADM)诱导产生人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM,构建稳定表达TRPC5的MCF-7细胞以及GFP标记的MCF-7/ADM(GFP-MCF-7/ADM)。流式细胞术(FACS)检测细胞表面的TRPC5和P-GP。分离MCF-7/ADM细胞培养上清中的EVs,并与MCF-7/WT共培养,检测后者的TRPC5和P-GP表达情况以及对ADM的耐药指数。MCF-7/ADM细胞接种裸鼠体内成瘤,TRPC5-siRNA瘤体内注射,检测裸鼠外周血中EVs及所携带TRPC5、P-GP的表达。结果:MCF-7/ADM细胞膜较MCF-7/WT细胞表面出现更高度的EVs化,EVs中聚集了大量干预药物ADM,TRPC5对于可促进乳腺癌耐药细胞中EVs的产生。含有TRPC5的EVs由乳腺癌耐药细胞分泌,并能进入乳腺癌敏感细胞,使后者获得耐药特性。在荷人乳腺癌细胞的裸鼠体内,TRPC5是乳腺癌细胞的分泌EVs的关键因素,而且EVs中的TRPC5、flotillin2、MDR1表达水平在TRPC5-siRNA处理后出现下调。结论:TRPC5可促进EVs的形成以及EVs对化疗药物的富集,含TRPC5的EVs在向敏感细胞传递耐药信息的作用,含TRPC5的EVs有望成为乳腺癌化疗耐药的一个预测指标。更多还原