蛋白质结晶新方法研究

【作者】 李兰芬； 米伟； 苏晓东；

【机构】 北京大学生命科学学院结构生物学实验室；

【摘要】 <正>以蛋白质晶体学为主要手段的结构基因组学研究通常包括选靶、克隆、表达、纯化、晶体筛选与优化、X射线衍射数据收集与结构解析等步骤。其中,获得满足衍射数据收集要求的高质量蛋白晶体是最大的"瓶颈"。我们在人类细胞内氯离子通道蛋白2(CLIC2)结构与功能研究中发现用5,5’二硫双-2-硝基苯甲酸(DTNB,Ellman试剂)处理CLIC2,可以显著提高CLIC2晶体质量,成功收集了分辨率至2埃的衍射数据(参见下图)。Ellman试剂作为一个检测巯基化合物的经典试剂,通常用在半胱氨酸或谷胱甘肽含量测定上。在蛋白晶体学领域里以获得蛋白晶体为目的的Ellman试剂修饰例子实际并不多。我们将其应用在蛋白结晶学领域,使用Ellman试剂修饰方法使蛋白晶体质量得到有效改善。更多还原