胚胎肝干细胞移植对四氯化碳诱导性肝纤维化大鼠肝组织Smad表达的影响

【作者】 张立英； 刘胜勇； 王珂； 田珑； 石献忠； 赵靖； 刘永寿； 张书永； 张卫光；

【机构】 北京大学医学部；

【摘要】 本实验旨在研究探讨胚胎肝干细胞移植对四氯化碳（CCl₄）诱导性肝纤维化大鼠的肝组织肝纤维化和肝组织中BMP-7信号转导通路下游因子Smad1/5表达的影响。将健康雄性Wistar大鼠（n=45）随机均分为对照组、肝纤维化组即细胞假移植组和细胞移植组。对照组大鼠每周一、四背部皮下注射橄榄油;肝纤维化组每周一、四背部皮下注射60%CCl₄橄榄油,分别连续注射10周;在6周肝纤维化大鼠的肝中叶注射移植胚胎肝干细胞2×10⁶。实验第11周麻醉处死所有大鼠,肝中叶取材。石蜡切片,行天狼猩红染色,观察肝组织中胶原纤维的增生情况;行免疫组织化学显色、Western blot分析和RT-PCR,观察肝组织Smad1/5的表达情况。肝组织天狼猩红染色显示:对照组仅可见少量的呈桔黄色的胶原纤维,肝纤维化组肝组织中胶原纤维大量增生,形成假小叶;细胞移植组肝组织中胶原纤维的增生较肝干细胞假移植组明显减轻。免疫组织化学显色显示:细胞移植组肝组织中Smad1/5阳性细胞较肝纤维化组明显增多。Western blot分析和RT-PCR结果与免疫组织化学显色的结果基本一致。胚胎肝干细胞移植后能够减少肝组织胶原纤维的增生,并可增加Smad1/5的表达,推测胚胎肝干细胞移植能够减轻肝纤维化的形成。更多还原