IKca1通道在HUVEC细胞增殖过程中的作用机制

【作者】 杨慧科； 张雅芳； 李晓冬；

【机构】 哈尔滨医科大学解剖学教研室；

【摘要】 本文通过给予血管生长因子VEGF-165刺激HUVEC细胞后,应用膜片钳技术、Westernblotting和Quantitative Real-Time RT-PCR方法检测HUVEC内皮细胞IKca1通道的功能活性、蛋白及mRNA表达水平。IKca1通道特异性阻断剂TRAM-34处理细胞48 h,联合使用MTT法和细胞计数法计数细胞,流式分析细胞周期,Western blotting检测周期蛋白Cyclin-D、周期依赖性激酶CDK4蛋白表达水平,分析TRAM-34对HUVEC细胞增殖、细胞周期的影响作用。研究发现,HUVEC内皮细胞表达IKca1蛋白,生长因子VEGF-165可增加IKcal通道电流,上调IKca1蛋白及mRNA表达。TRAM-34呈现浓度依赖性抑制细胞的增殖。同时发现,TRAM-34下调周期蛋白Cyclin-D和周期依赖性激酶CDK4的表达,在G₀/G₁期抑制细胞增殖。实验表明,IKcal通道选择性阻断剂TRAM-34通过影响细胞周期抑制VEGF-165诱导HUVEC细胞增殖过程。更多还原