尿硫酸化胆汁酸代谢轮廓分析用于妊娠肝内胆汁淤积症的诊断和分度

【作者】 陈建波； 冯成亚； 邵勇； 丁敏；

【机构】 重庆医科大学医学检验系,临床检验诊断学教育部重点实验室；

【摘要】 妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)是妊娠中晚期特有的肝脏疾病。ICP最主要的是对胎儿产生的危害,如围产儿死亡、胎儿宫内窘迫、早产、新生儿窒息、羊水胎粪污染等。ICP发病使胎儿致病机理尚不明确,具家族性、复发性特点。ICP目前还无公认的统一的诊断和分度标准。本文采用液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)进行尿硫酸化胆汁酸进行代谢轮廓分析。通过商品化的三种硫酸化胆汁酸标准品质谱条件的优化,探索硫酸化胆汁酸的最佳离子化参数。根据硫酸化胆汁酸的性质选择合适的流动相、色谱柱,并测试不同条件下的梯度洗脱方式,探索最佳的色谱条件。通过考察不同条件下的尿液样品处理方式,探索和优化尿液样品的处理条件。在已优化的色谱、质谱及样品处理条件基础上,研究和探索检测尿中硫酸化胆汁酸的最佳质谱条件,并通过回收试验、精密度试验、灵敏度、检测线性等评估所建立的方法学的性能。根据现有的ICP病人诊断与分度标准,收集18例正常孕妇、20例轻度ICP病人、23例重度ICP病人尿液标本,采用HPLC-MS法对三类人群的尿硫酸化胆汁酸进行分析。结果表明:与正常孕妇组相比,总硫酸化胆汁酸(Total3S-BA)在轻度ICP组和重度ICP组分别增加了4.0倍和9.0倍,其中最主要的贡献是硫酸化甘氨结合性胆汁酸(Total3S-GlycoBA)和硫酸化牛磺结合性胆汁酸(Total3S-TauroBA),分别增加3.2倍和4.5倍(轻度ICP组),11.6倍和23.2倍(重度ICP组)。3S-TauroBA/3S-GlycoBA在正常孕妇组、轻度ICP组和重度ICP组分别为44.8%、62.1%和89.5%,显示硫酸化牛磺结合性胆汁酸在ICP组比硫酸化甘氨结合性胆汁酸增加更多。重度ICP患者和正常孕妇基本能区分,但轻度ICP患者仍难以和重度ICP患者及正常孕妇区分。运用该模型,诊断重度ICP患者正确率为90.0%,诊断正常孕妇正确率为88.9%,而诊断轻度ICP患者正确率仅为35.0%。该模型对三组总的判对率为70.5%。更多还原