栉孔扇贝冷休克结构域蛋白(CfCSP)的功能研究

【作者】 杨传燕； 王玲玲； Vinu.S.S.； 史晓委； 宋林生；

【机构】 中国科学院海洋研究所；

【摘要】 冷休克结构域蛋白是一组高度保守的核酸绑定蛋白,广泛存在于从细菌到人类的各种生命体中,主要参与生物体的冷适应反应。本研究采用EST、RACE、RT-PCR、基因原核表达和凝胶阻滞等分子生物学技术以及部分生物信息学分析方法,开展了栉孔扇贝冷休克结构域蛋白(CfCSP)基因的克隆分析、表达及其功能的研究。栉孔扇贝CfCSP的cDNA全长1735 bp,编码308个氨基酸,含有一个N端序列高度保守的CSD结构域。RT-PCR结果表明,CfCsP在扇贝各组织中呈组成型表达,并在闭壳肌中表达量最高:冷刺激可以显著地诱导CfCSP在闭壳肌和血细胞中的表达。体外核酸结合实验表明,原核重组表达的rCfCSP能够结合单链DNA和体外转录生成的荧光素酶mRNA,但不能结合双链DNA。将pⅠNⅢ-CfCSP转染冷生长缺陷大肠杆菌突变株BX04,结果表明CfCSP能够有效促进BX04在低温条件下的生长。本研究结果表明,栉孔扇贝CfCSP是受冷诱导的核酸绑定蛋白在真核生物中的新成员,作为RNA伴侣参与扇贝的冷适应反应。更多还原