盐酸小檗碱对抗大鼠阿霉素性急性心肌损伤作用的线粒体机制

【作者】 张玉； 熊晨； 郭会彩； 苏素文；

【机构】 河北医科大学药理学教研室； 河北医科大学卫生毒理教研室；

【摘要】 目的观察盐酸小檗碱（Ber）在阿霉素（DOX）性急性心肌损伤中的作用及其与细胞内钙和线粒体稳态的关系。方法选用SD大鼠50只,随机分为五组,即空白对照（Con）组、DOX组、Ber 5 mg/kg、10 mg/kg及20 mg/kg组,每组10只,Ber组均采用灌胃给药。Con组及DOX组均给予等容积的蒸馏水,每日一次,连续10天。于第8天除对照组外,其余各组均i.p.DOX 20mg/kg。第10天给予Ber 30 min后将大鼠麻醉,剖开动物的胸、腹腔,观察动物的胸、腹腔内积液情况并记录。之后自腹主动脉取血、离心,分离上清液备血清中心肌酶（CK、CK-MB）和抗氧化酶（SOD、CAT及MDA）的含量测定。并将心脏称重,一部分心脏组织用于组织病理学检查,一部分制成10%的匀浆备心肌组织中MDA和SOD的含量测定。另取急性分离的SD大鼠心室肌细胞,分别用Fluo3-AM,Rhod-2及Rhodamine（Rh-123）负载,观察DOX单独或联合应用Ber对细胞内Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i),线粒体Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_m)及线粒体膜电位（△Ψm）的影响。结果DOX组动物给药后48h出现体重减轻,竖毛及倦怠等症状,剖检胸腹腔内可见不同程度的积液,大网膜呈白色脂类变。血清中CK及CK-MB均较Con组升高,心肌组织中CAT及SOD水平下降,MDA水平升高。组织病理学结果显示心肌间质水肿、淤血,伴大量炎细胞浸润。Ber组动物的一般状况均优于DOX组。各剂量均未见胸腔积液,腹腔积液成剂量依赖性减轻,腹腔内脂样变少见。和DOX组相比,血清中CK及CK-MB水平均减低,心肌匀浆中CAT和SOD水平升高,MDA水平下降,且有剂量依赖性。组织病理学结果显示Ber各剂量组可不同程度缓解DOX所致心肌细胞的炎细胞浸润和水肿现象,以大剂量组作用最为明显。在急性分离的大鼠心室肌细胞上,给予1μmol/L的DOX可引起[Ca²⁺]_i和[Ca²⁺]_m升高,△Ψm降低,随着时间延长（约15min）,细胞出现挛缩。而给予1μmol/L的Ber,可有效抑制DOX所致的[Ca²⁺]₁和[Ca²⁺]_m的升高,恢复ΔΨm。结论 Ber对抗DOX性急性心肌损伤的保护机制可能和其可恢复细胞内Ca稳态和增强线粒体的功能有关。更多还原