PM_2.5对人原代支气管上皮细胞内炎症因子和活性氧的诱导

【作者】 吴磊； 江高峰； 陈丹； 宋世震；

【机构】 武汉科技大学公共卫生学院；

【摘要】 目的观察PM25及其主要可溶性金属成分对人支气管上皮细胞主要炎症因子IL-1,IL-6和IL-8产生和ROS的诱导作用及其机制。方法人原代支气管上皮细胞初始接种于支气管上皮细胞基础培养基的组织培养瓶中(0.5μg·L^-1的人表皮生长因子,0.5 mg·L^-1的氢化可的松,5 mg·L^-1的胰岛素,10 mg·L^-1转铁蛋白,0.5 mg·L^-1的肾上腺素,6.5μg·L^-1的三碘甲腺原氨酸,50 mg·L^-1庆大霉素,50μg·L^-1两性霉素-B,52 mg·L-1牛垂体提取物和0.1μg·L^-1视黄酸);将采购的PM2.5颗粒物悬浮于超纯水中,用前超声混匀制成25,50和100 mg·L^-1低中高三个剂量备用,对照组PM2.5浓度为0 mg·L-1。将培养的人原代支气管上皮细胞暴露与PM_2.5悬液共培养24 h,收集培养液并离心,使用人ELISA试剂盒测定IL-8、IL-6、肿瘤坏死因子和IL-1β在上清液中的水平;使用流式细胞仪（氩离子激光器,波长488 nm）并利用荧光探针检测人原代支气管上皮细胞内活性氧的发生。结果与对照组相比,PM_2.525,50和100 mg·L^-1处理组,IL-1含量存在显著差异（P<0.05）,但不同浓度组间IL-1含量无明显差异。IL-8在低剂量和高剂量组与对照组比较有显著性差异,不同剂量组间无显著性差异。TNF-α对照组与各处理组见均有显著性差异（F=10.819,P<0.05）,处理组间低、中剂量组与高剂量组间差异有显著性（P<0.05）。IL-6含量对照组与100 mg·L^-1组有显著差异（F=17.010,P<0.05）,而与低、中浓度组比较无明显差异,且此两组间也无明显差异。ROS平均荧光强度有显著性差异（F=84.814,P<0.01）,且不同浓度处理组间差异也具有显著性。结论人支气管上皮细胞暴露于PM_2.5环境下能促使细内炎性因子的产生;不同浓度梯度下对细内ROS具有明显的诱导作用且呈剂量反应关系。更多还原