生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖中Notch信号蛋白的表达及意义

【作者】 何宁； 张静姝； 刘英华； 姜淑卿； 张静； 管彤； 王晓军； 张书婧；

【机构】 天津市疾病预防控制中心；

【摘要】 目的探讨δ-生育三烯酚对人结肠癌细胞SW620细胞增殖抑制作用,研究Notch信号通路中关键蛋白在δ-生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖中的表达及意义。方法 （1）观察δ-生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖的作用（MTT试验）。接种于24孔板的人结肠癌细胞SW620进入对数生长期后,将SW620换成给予不同浓度的δ-生育三烯酚(终浓度为0,5,10,15,20,25和30μmol·L^-1)的培养基,溶剂对照组为无水乙醇,继续于相同条件下培养24 h后,加入MTT溶液,继续培养4 h,酶标仪检测各孔OD值,并计算细胞存活率。（2）通过免疫细胞化学方法检测Notch信号通路关键蛋白Notch,、Jagged的表达变化。（3）放线菌酮（CHX）对生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖作用的影响。接种于24孔板的人结肠癌细胞SW620进入对数生长期后,加入CHX的完全培养液,37℃培养1 h后,加入终浓度为20μmol·L^-1的δ-生育三烯酚,上述方法进行MTT试验,并计算细胞存活率。结果 （1）在5,10,15,20,25和30μmol·L^-1的剂量范围内,随着δ-生育三烯酚浓度的增加,SW620细胞的存活率呈显著下降的趋势,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。（2）Notch信号通路关键蛋白Notch1在生育三烯酚作用一定剂量范围内表达量降低,Jagged1蛋白随着生育三烯酚作用剂量的增加,其的表达量在一定剂量范围内逐渐降低。（3）经放线菌酮CHX处理过的细胞,再加入δ-生育三烯酚,作用24 h后,细胞存活率较单独加入生育三烯酚作用的细胞存活率显著增高,结果有统计学意义。结论δ-生育三烯酚抑制人结肠癌细胞SW620增殖的过程与Notch信号通路的激活有关,细胞的死亡的方式可能为paraptosis样死亡。更多还原