微囊藻毒素-LR对小鼠肝组织DNA甲基化的影响

【作者】 农清清； 何灏逾； 韦宏旷； 陆继培； 李春宏； 范誉；

【机构】 广西医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学教研室；

【摘要】 目的研究微囊藻毒素-LR（Microcystin-LR,MCLR）短期重复暴露对小鼠肝组织DNA总体甲基化水平、DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase,DNMT）mRNA表达的影响。方法 80只健康昆明小鼠,随机分为2批,每批4组,每组10只,即对照组(含0.02%二甲基亚砜的生理盐水0.005 ml·g^-1)、MCLR低(5μg·kg^-1)、中(10μg·kg^-1)、高(20μg·kg^-1)剂量组,每日经腹腔注射染毒,分别染毒10和20d。提取并水解小鼠肝组织DNA,采用高效液相色谱法测定DNA总体甲基化水平;提取肝组织总RNA,逆转录成cDNA,用实时荧光定量PCR法测定DNMT1,DNMT3a,DNMT3b的mRNA表达水平。结果染毒10 d后,各剂量组DNA总体甲基化水平未出现明显差异。染毒20 d中、高剂量组DNA总体甲基化水平为（2.26±0.60）%和（2.16±0.51）%,均低于对照组的（3.31±0.86）%,差异均有统计学意义（P<0.05）。染毒10 d高剂量组DNMT1、DNMT3a及DNMT3b的mRNA表达水平均下调（P<0.05）,染毒20d后,中、高剂量组中DNMT1,DNMT3a及DNMT3b的mRNA表达水平与对照组比较均下降（P<0.05）,其中,中剂量组DNMT1,DNMT3a及DNMT3b的mRNA表达水平分别降至对照组的38.3%,59.9%,21.5%,差异均有统计学意义（P<0.05）。肝组织DNMT1,DNMT3a,DNMT3b mRNA表达水平与DNA总体甲基化水平呈正相关关系(r_DNMT1=0.47,P<0.01;r_DNMT3a=0.37,P<0.01;r_DNMT3b=0.36,P<0.05)。结论 MCLR短期重复暴露可抑制小鼠肝组织DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达,降低DNA总体甲基化水平。MCLR引起的基因组总体DNA甲基化水平降低可能与DNMT1,DNMT3a和DNMT3b的表达下调有关。更多还原