苯并(a)芘对神经元的细胞毒性及CYP1A1的诱导表达

【作者】 聂继盛； 张红梅； 刘慧君； 张勤丽； 牛侨；

【机构】 山西医科大学共公共卫生学院劳动卫生教研室；

【摘要】 目的研究苯并(a)芘对神经元细胞毒性、细胞凋亡与CYPlA1诱导表达的关系。方法选用新生1～3d的SD大鼠分离大脑皮质进行神经元培养,在细胞培养第5天左右,选取生长良好的同批次神经细胞,以苯并(a)芘分别对神经元染毒,使苯并(a)芘终浓度分别为0μM、10μM、20μM,40μM。继续培养48h,应用cck8试剂盒检测神经元活力、Annexin V和PI双染法进行细胞凋亡的检测,应用RTPCR法对神经元CYP1A1mRNA表达,免疫组化SABC法和Western-blot检测了神经元CYP1A1蛋白的表达。结果随着B(a)P浓度的增加,神经元细胞活力降低、早期凋亡率逐渐增高,细胞活力中高剂量组与对照组比较差异均有统计学意义,早期凋亡率仅高剂量组与对照组比较差异有统计学意义,趋势检验表明细胞活力降低、凋亡率增高具有剂量依赖性。而且随B[a]P剂量的增高,CYP1A1mRNA及蛋白表达增多,有剂量-反应关系,CYP1A1基因和蛋白表达与神经元细胞凋亡率的相关分析表明:神经细胞凋亡率与CYP1A1mRNA表达呈正相关(r=0.831,P<0.01);与CYP1A1蛋白表达呈正相关(r=0.780,P<0.01)。结论B (a)P可致神经细胞凋亡,神经元CYP1A1诱导表达是神经元损伤的关键因素。更多还原