职业性三氯乙烯药疹样皮炎病例血清差异蛋白质组学研究

【作者】 黄振烈； 越飞； 杨杏芬； 梁丽燕； 黄建勋； 李来玉； 黄汉林；

【机构】 广东省职业病防治院； 广东省疾病预防控制中心；

【摘要】 目的比较三氯乙烯药疹样皮炎病例发病急性期时与恢复期的血清蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定三氯乙烯药疹样皮炎病例差异表达的血清蛋白质,为三氯乙烯药疹样皮炎的发病机制研究提供线索。方法收集8例三氯乙烯药疹样皮炎病例发病急性期与恢复期的血清。血清总蛋白去除白蛋白、IgG和丙酮沉淀去盐分处理后,以固相pH梯度等电聚焦(IEF)为第一向和垂直十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为第二向进行双向凝胶电泳(2- DE),经银染显色和PDQuest7.4.0软件分析凝胶图像,对表达丰度大于或等于3倍的血清蛋白质用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF)进行鉴定,并初步探讨蛋白质的功能。结果建立并优化了三氯乙烯药疹样皮炎病例血清蛋白质的双向凝胶电泳条件,成功获得了重复性较好的蛋白质二维图谱。三氯乙烯药疹样皮炎病例发病急性期与恢复期的血清蛋白质表达谱发生了改变。将其中41个明显差异表达的蛋白质进行串联质谱分析,在非冗余NCBI蛋白序列数据库中检索,成功鉴定出33个蛋白。其中只在发病急性期表达,恢复期不表达的蛋白有9个,分别为S100A8、角蛋白1、2个血清淀粉样蛋白SAA、S100A8/ S100A9、铁蛋白轻链、亮氨酸氨肽酶、肝组织1,6-二磷酸果糖缩醛酶A链、着丝粒蛋白F;7个蛋白在发病急性期的表达显著高于恢复期,分别为重组血红蛋白A链、Lepore-Baltimore血红蛋白、酯蛋白CⅢ、血浆谷胱甘肽过氧化物酶、3个载酯蛋白E前体;17个蛋白在恢复期的表达丰度比发病急性期高3倍以上,分别为视黄醇结合蛋白、人乙酰辅酶A羧化酶、载酯蛋白M、α结合珠蛋白2、2个结合珠蛋白、角蛋白1、2个未知蛋白、羧肽酶N-多肽1前体、2个人补体C3β链。其中补体C3的β组分在发病急性期的表达水平低于恢复期的水平。结论三氯乙烯药疹样皮炎患者发病急性期与恢复期的血清蛋白质表达谱发生了明显改变,串联质谱鉴定的结果为三氯乙烯药疹样皮炎发病机制的进一步研究提供了线索,提示补体途径可能参与了发病的过程,与病例急性期的肝损伤有密切的关系。更多还原