Periostin诱导肺腺癌细胞A549发生EMT过程从而增强其转移能力

【作者】 吕晓静； 杨笛； 张寄南； 施毅；

【机构】 南京军区南京总医院呼吸科； 南京医科大学第一附属医院心血管病研究所；

【摘要】 目的:建立稳定表达periostin(骨膜素)的肺腺癌细胞A549,观察periostin对A549的增殖及迁移能力的影响,从而研究periostin促进非小细胞肺癌转移的信号转导途径。方法:逆转录病毒载体pCMV-neo/POSTN转染肺腺癌细胞A549,G418筛选出稳定表达periostin的A549细胞,分别以MTT法和划痕法研究转染细胞与非转染细胞的增殖能力及迁移能力的改变,用Western-blotting方法检测转染细胞与非转染细胞的EGFR(表皮生长因子受体)表达水平的改变,real-time PCR方法检测转染细胞与非转染细胞的EMT(上皮-间质表型转换)基因(如波形蛋白,E-钙粘素,N-钙粘素)的mRNA水平,应用EGFR拮抗剂(EGFR酪氨酸激酶抑制剂和EGFR单克隆抗体)干预后细胞迁移能力的改变和EMT基因的mRNA水平的变化情况。结果:转染细胞与非转染细胞相比,增殖能力无显著差异,迁移能力增强,EGFR的表达上调,高EMT表型(E-钙粘素低表达,N-钙粘素和波形蛋白高表达),应用EGFR拮抗剂干预细胞后,periostin导致的转染组细胞的高EMT表型有所下调。结论:periostin能够促进肺腺癌细胞A549的转移能力,该过程是通过上调细胞的EGFR,使细胞发生EMT过程实现的,阻断EGFR可部分逆转periostin导致的高EMT表型和细胞转移能力的增强。更多还原