JNK抑制剂抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元caspase-3的表达

【作者】 钱涛； 闫凤霞； 高维娟； 叶冬青； 张雅丽； 侯志平；

【机构】 承德医学院病理生理学教研室；

【摘要】 目的:观察JNK抑制剂(SP600125)对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因caspase-3表达的影响。方法取原代培养8d的大鼠海马神经元,随机分为7组:正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪注射液溶剂对照组、黄芪注射液组、DMSO组(二甲基亚枫组即SP600125溶剂组)、SP600125组、SP600125+黄芪注射液组。除正常对照组外均进行缺氧缺糖0.5h再复氧复糖。各组于复氧复糖后6h、24h、48h采用Western blotting方法检测caspase-3蛋白的表达、采用RT-PCR方法检测caspase-3 mRNA的表达。结果:Western blotting检测结果显示:各时间点缺氧缺糖/复氧复糖组海马神经元caspase-3蛋白的平均灰度值均较正常对照组明显增加(P<0.05),24h平均灰度值最高;与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪注射液溶剂对照组和DMSO组各时间点caspase-3蛋白的平均灰度值无明显变化(P>0.05),而黄芪注射液组、SP600125组和SP600125+黄芪注射液组在各个时间点caspase-3蛋白的平均灰度值均明显降低(P<0.05);与黄芪注射液组相比,SP600125+黄芪注射液组和SP600125组各时间点caspase-3蛋白的平均灰度值无显著变化(P>0.05)。RT-PCR结果显示:各时间点缺氧缺糖/复氧复糖组海马神经元caspase-3 mRNA的平均光密度值均较正常对照组明显增加(P<0.05),24h平均光密度值最高;与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪注射液溶剂对照组和DMSO组各时间点caspase-3 mRNA的平均光密度值无明显变化(P>0.05),而黄芪注射液组、SP600125组和SP600125+黄芪注射液组在各个时间点caspase-3 mRNA的平均光密度值明显降低(P<0.05);与黄芪注射液组相比,SP600125+黄芪注射液组和SP600125组各时间点caspase-3 mRNA的平均光密度值无明显变化(P>0.05)。结论:黄芪注射液可通过抑制JNK3信号通路的激活而减少Caspase-3的表达,从而抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元的凋亡。更多还原