淫羊藿甙下调VASP及其对胃癌细胞侵袭转移的影响

【作者】 王静； 苏可； 石文韬； 张洁； 张玲； 王永平； 魏蕾；

【机构】 武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系；

【摘要】 目的:肿瘤细胞自身的迁移能力与肿瘤侵袭转移密切相关。血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP)作为一种肌动蛋白调节蛋白,能调节细胞黏附及伸展过程中肌动蛋白的重排,在肿瘤细胞迁移中发挥重要作用。淫羊藿甙(ICA)可抑制肿瘤细胞黏附与运动。本实验通过观察淫羊藿甙对胃癌细胞BGC-823的侵袭转移能力的影响,研究在胃癌细胞侵袭转移过程中淫羊藿甙对VASP表达水平的影响。方法:常规培养胃癌细胞系BGC-823;(1)在胃癌细胞中,加入不同浓度淫羊藿甙,24h后损伤修复实验和细胞侵袭实验检测各实验组胃癌细胞迁移和侵袭能力;(2)在胃癌细胞中,加入ICA后,RT-PCR检测VASP mRNA水平,western blotting检测VASP蛋白表达水平;(3)设计并合成三对靶向VASP mRNA的寡核苷酸链,克隆入pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体,构建表达shRNA的真核表达载体SS1、SS2、SS3,脂质体法转染入胃癌细胞,24h后加入ICA,RT-PCR检测VASP mRNA水平,Western blotting检测VASP蛋白表达水平;损伤修复实验和细胞侵袭实验检测各实验组胃癌细胞迁移和侵袭能力。结果:淫羊藿甙以时间和浓度依赖方式降低BGC-823细胞迁移和侵袭能力;淫羊藿甙抑制BGC-823细胞中VASP表达;BGC-823细胞的VASP表达可被质粒导入的外源性siRNA-VASP有效抑制,介导细胞迁移和侵袭能力降低。结论:淫羊藿甙可通过抑制VASP表达,抑制胃癌细胞BGC-823迁移与侵袭。更多还原