硫化氢是调节巨噬细胞源性泡沫细胞形成的重要分子

【作者】 赵战芝； 姜志胜； 唐朝枢； 王仁； 李国华； 谭建苗；

【机构】 南华大学心血管病研究所暨动脉硬化学湖南省重点实验室； 北京大学第一附属医院心血管病研究所；

【摘要】 <正>目的:研究硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）及主要生成酶胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine gamma lyase,CSE）和胱硫醚-β-合酶（cystathionine-β-synthase,CBS）在泡沫细胞形成过程中的变化及对ox-LDL诱导THP-1源性巨噬细胞转变为泡沫细胞的影响。方法:THP-1源性巨噬细胞用不同浓度ox-LDL（25～100μg/mL）孵育48 h或用50μg/mL ox-LDL孵育不同时间（12～48 h）,或同时分别与炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine,PAG,CSE抑制剂）、羟胺（hydroxylamine,HA,CBS抑制剂）、L-半胱氨酸（L-Cys）、NaHS（H₂S供体）孵育48 h,亚甲基蓝法测细胞上清中H₂S含量,RT-PCR法测CSE、CBS的mRNA水平,HPLC法测细胞内胆固醇水平。结果:THP-1源性巨噬细胞有丰富的CSE mRNA表达及少量的CBS mRNA表达,能内源性产生H₂S。ox-LDL处理后使细胞CSE和CBS mRNA均表达减少,使细胞上清中H₂S含量（用蛋白标化）降低,呈剂量和时间依赖性。PAG和HA也能明显降低细胞上清中H₂S含量,且与ox-LDL具有协同效应,而L-Cys均能明显增加正常或ox-LDL刺激的巨噬细胞上清中H₂S含量。HPLC结果显示,PAG和HA不同程度地增加ox-LDL诱导的细胞内总胆固醇和胆固醇酯水平,而L-Cys和NaHS呈浓度依赖性降低细胞内总胆固醇和胆固醇酯水平,其中3 mmol/L L-Cys和200μmol/L NaHS使细胞内总胆固醇浓度较ox-LDL组分别降低20.1%（P<0.05）和21.4%（P<0.05）。结论:内源性H₂S通路（CSE/H₂S和CBS/H₂S）可能参与调节ox-LDL诱导的泡沫细胞形成,而H₂S能抑制泡沫细胞形成。更多还原