钙敏感受体在人单核巨噬细胞株THP-1中的表达与功能

【作者】 席玉慧； 王丽娜； 李鸿珠； 白淑芝； 李宏霞； 张伟华； 徐长庆；

【机构】 哈尔滨医科大学病理生理教研室；

【摘要】 <正>目的:探讨钙敏感受体(Calcium sensing receptor,CaSR)在人单核巨噬细胞株THP-1中的表达与功能。方法:首先将人单核细胞株THP-1用佛波脂(PMA,100 nmol/L)诱导,使之转化为具有贴壁能力的巨噬细胞株THP-1(以下简称THP-1)。用Western blot法检测CaSR在THP-1中有无表达;用免疫荧光法检测CaSR在THP-1中细胞定位;用激光扫描共聚焦显微镜观察CaSR激活后细胞内钙的变化及其信号通路;用ELISA法检测CaSR的激活对THP-1分泌细胞因子IL-1β、TNFα的影响。结果:(1)CaSR在THP-1的细胞质和细胞膜均有分布,但主要分布在细胞膜;(2)提高细胞外钙或用CaSR特异激动剂氯化钆(GdCl3,1 mmol/L)处理THP-1后,可见细胞内钙离子浓度迅速上升;该作用可被磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122(10μmol/L)和内质网钙泵抑制剂TG(thapsigargin,10μmol/L)消除;(3)用脂多糖(LPS,1 mg/L)处理后,THP-1细胞培养上清液中IL-1β、TNFα的含量均明显高于未处理组;(4)用GdCl3处理,细胞培养上清液中IL-1β、TNFα的含量亦明显升高,但该作用可被CaSR特异抑制剂NPS2390(10μmol/L)所抑制。结论:CaSR在人单核巨噬细胞株THP-1中有功能性表达。它提示钙敏感受体激活可能参与涉及单核巨噬细胞激活的各种疾病。更多还原