【作者】 曲悦君； 张庭庭； 韩志远； 曾欣； 成莹； 许继德；

【Author】 Yue-Jun QU Ting-Ting ZHANG Zhi-Yuan HAN Xin ZENG Ying CHENG Ji-De XU (Department of Physiology, Guangzhou Medical University, Guangzhou, 510182, China)

【机构】 广州医学院生理学教研室；

【摘要】 目的:研究姜黄素对气道平滑肌细胞(Airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖的作用及其机制。方法:(1)用卵白蛋白制备BALB/c小鼠气道重塑模型,以不同剂量姜黄素干预,检测气道反应性,图像分析软件IPP测支气管壁厚度和平滑肌层厚度。(2)体外培养原代大鼠气道平滑肌细胞,用CCK-8法检测血小板源生长因子(Platelet-derivedgrowth factor,PDGF)和PDGF加姜黄素处理的ASMCs A450的光密度值。Western blotting检测ERK1/2蛋白的表达水平。用间接免疫荧光检测caveolin-1在ASMC的定位。用MβCD预处理细胞。Western blotting检测对照组、PDGF增殖组、姜黄素处理组和PDGF加姜黄素联合用药组的caveolin-1蛋白表达情况,RT-PCR检测不同组别caveolin-1及ERK mRNA的表达水平。结果(1)与模型组相比,姜黄素干预组的气道反应性显著降低,P<0.05。姜黄素干预组的支气管壁厚度、支气管平滑肌层厚度及支气管平滑肌细胞数量均显著低于模型组,P<0.05。(2)与对照组比较,CCK-8法检测给予PDGF2d后,10ng/ml PDGF组和50ng/ml PDGF组的A450的光密度值均显著增加,P<0.01。给予姜黄素处理12、24和36h后,与对照组比较,11.25μmol/l组、16.88μmol/l组和25.31μmol/l组的细胞平均抑制率均增加显著,P<0.05。姜黄素(25μmol/l)加PDGF(25ng/ml)处理20、40和60min后ERK1/2蛋白表达水平均显著降低。(3)免疫荧光技术显示,caveolin-1存在于ASMC的细胞膜上。与单独用PDGF处理组相比,MβCD预处理组姜黄素抑制细胞增殖的效应减弱(P<0.05)。PDGF加姜黄素共处理组caveolin-1蛋白表达相比PDGF组明显升高(P<0.01),单独用姜黄素组表达也有升高(P<0.05)。用RT-PCR检测mRNA表达时,PDGF加姜黄素共处理组相比于PDGF组,caveolin-1mRNA表达降低(P<0.05)。结论姜黄素抑制哮喘小鼠气道重塑模型中和体外培养原代大鼠气道平滑肌细胞增殖,其机制与姜黄素抑制ERK信号通路相关;caveolin-1存在于ASMC的细胞膜上,姜黄素可能是通过抑制caveolin-1的降解来调节caveolin-1的表达水平从而抑制大鼠ASMC的增殖。更多还原