屎肠球菌对断奶前仔猪小肠黏膜屏障功能的影响

【作者】 黄怡； 李卫芬； 崔志文； 李雅丽； 余东游； 黄琴；

【机构】 浙江大学动物科学学院教育部动物分子营养学重点实验室； 广西大学动物科学技术学院；

【摘要】 观察屎肠球菌(Enterococcus faecium)EF1对断奶前仔猪小肠黏膜屏障功能的影响,为阐明其益生作用机理提供依据。随机选取胎次、窝产仔数和出生时间相近、体重差异不显著的6窝杜×长×大外三元新生仔猪,分为2个组,每组3窝。仔猪出生后,在其开始吮吸母乳前,经口灌服10%的灭菌脱脂乳溶液(对照组)或含屎肠球菌EF1(5×10~8～6×10~8 CFU/ml)的10%灭菌脱脂乳溶液(益生菌组),灌服量为2ml/(头·天),之后每隔1天灌服1次,共灌服3次。母猪饲料不添加抗生素。仔猪于断奶前(25日龄)称空腹重后,每窝选2头,采集前腔静脉血,屠宰,采集各部位样本,用ROCHE454高通量测序法检测盲肠内容物菌群结构,用荧光定量PCR法检测空肠黏膜基因表达量,用ELISA法检测细胞因子等含量。结果表明,与对照组相比,益生菌组仔猪的日增重提高30.73%(P<0.01),腹泻率下降43.21%(P<0.05);肠道菌群多样性变化不明显,但显著改变菌群组成,其中厚壁菌比例增加1.05倍(P<0.05),拟杆菌、变形菌和梭杆菌门比例则分别减少52.74%(P<0.05)、14.67%(P<0.05)和86.27%(P<0.05);空肠黏膜sIgA分泌量提高29.90%(P<0.01),溶菌酶基因表达则降低66.46%(P<0.01);空肠绒毛长度以及绒毛高度:隐窝深度的比率分别增加17.01%(P<0.01)和22.46%(P<0.01);空肠和回肠黏膜的DAO活性分别增加39.45%(P<0.01)和98.47%(P<0.01),而ITF含量则分别减少19.84%(P<0.01)和38.05%(P<0.05);空肠黏膜的ocIn基因表达下调51.88%(P<0.01),zo-1基因表达无显著变化(P=0.590),血清DAO活性有少量增加(P=0.088),内毒素的含量很低;回肠黏膜TNF-α和空肠黏膜IFNγ含量分别减少56.62%(P<0.01)和43.43%(P<0.01),空肠和回肠黏膜IL-1、IL-6、IL-12和IL-8的含量也都极显著减少(P<0.01),而空肠和回肠黏膜IL-10含量以及空肠黏膜TGF-β1含量则分别增加56.65%(P<0.01)、21.83%(P<0.05)和208.02%(P<0.01),tgf-β1基因表达量也上调63.52%(P<0.05);空肠黏膜tnf-α基因表达和TNF-α分泌分别上调172.88%(P=0.010)和50.61%(P<0.05),而回肠黏膜TGF-β1和IFNγ的分泌量都没有显著变化(P>0.05);空肠黏膜tlr2、tlr9和traf6基因表达分别上调185.31%(P<0.01)、87.46%(P<0.05)和48.36%(P<0.05)。结果提示,口服屎肠球菌EF1促进断奶前仔猪生长和肠道健康的益生作用在于改善肠道微生态平衡、调节肠黏膜化学屏障和机械屏障功能以及先天免疫应答;屎肠球菌EF1对仔猪肠黏膜有双向性免疫调节作用,分子机理与TLRs介导的信号传导途径有关。更多还原