促性腺激素释放激素受体和性激素受体在小尾寒羊脊髓中的共表达

【作者】 袁学军； 崔胜；

【机构】 山东农业大学生命科学学院； 中国农业大学；

【摘要】 促性腺激素释放激素(GnRH)是重要的生殖调控激素,它通过靶组织上受体起作用。下丘脑和垂体是GnRH主要的靶组织。近年来,大量研究显示GnRH及其受体在下丘脑以外的器官广泛表达,包括大脑和脊髓等神经组织。GnRH受体(GnRH-R)可分为三种亚型:Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型(Millar et al.,2004;Morgan and Millar,2004)。Ⅰ型GnRH-R在哺乳动物的表达已有报道(Kakar et al.,1992)。Ⅱ型GnRH-R在人和黑猩猩(Morgan et al.,2003),牛(Millaret al.,2004),羊(Gault et al.,2004)等动物体内表现沉寂不表达,绵羊体内只鉴定了一种GnRH-R,即Ⅰ型GnRH-R。雌激素在神经系统具有神经保护和神经营养作用,它通过靶器官上雌激素受体参与神经元分化和存活,促进神经系统的发育(Platania et al.,2003)。雄激素也可参与与雄激素敏感的神经元活动(Blanchet et al.,2005)。为了更好地理解绵羊脊髓中GnRH的生理作用,本文拟用原位杂交方法研究Ⅰ型GnRH-R在绵羊脊髓的表达,用免疫组化和原位杂交双标记方法研究Ⅰ型GnRH-R和性激素受体(AR、ER)的共表达情况。本实验选用性成熟的小尾寒羊为对象,制备脊髓的冰冻切片,用地高辛标记的cRNA探针进行原位杂交,杂交后再做AR、ERα的免疫组化染色。显色结果用Leica DFC320数码相机照相。本文是首次报道GnRH-R mRNA和AR、ERα蛋白在绵羊脊髓中的定位表达。GnRH-RmRNA的原位杂交显色的阳性部位在胞质,在腹角大、中型运动神经元(15μm以上)表达。在中间带较少,在腹角外侧大神经元较多。在背角未见明显的杂交信号。AR和ERα的免疫组化阳性部位在胞核,在背角和腹角神经元都有表达,ERα在背角的颈、基部中央区神经元核内显示阳性反应,在腹角大神经元有表达。AR在白质胶质细胞也有表达。在腹角神经元GnRH-R和AR、ERα存在很高比例的双染。AR、ERα存在于与生殖器官感觉和自主神经支配相关的脊髓节段,表明他们与所在神经元的感觉和运动支配机能都有关,可以通过这些神经元影响生殖器官的活动。GnRH-R mRNA和AR、ERα蛋白在腰段脊髓腹角中存在双染现象,提示性激素和GnRH之间在脊髓运动神经元中存在一定的相互作用。更多还原