PIPP对小鼠卵母细胞减数分裂恢复的影响

【作者】 邓欣； 于大海； 高雅； 李亘松； 曹宇； 于秉治；

【机构】 中国医科大学基础医学院机能实验中心； 中国医科大学附属第二医院生殖医学中心； 中国医科大学； 中国医科大学基础医学院生理学教研室； 中国医科大学基础医学院生物化学和分子生物学教研室；

【摘要】 肌醇多磷酸5-磷酸酶(PIPP)作为PI3K/Akt信号途径的抑制因子,通过抑制Akt在Ser473位点的磷酸化在细胞生理学的许多信号转导级联反应中起着重要的调节作用。虽然我们以前报道了PIPP可以调控小鼠1-细胞期受精卵的有丝分裂,然而PIPP在小鼠卵母细胞中对其减数分裂恢复的影响尚不清楚。本研究中,我们将si PIPP显微注射入GV期卵母细胞观察了si PIPP对Cdc2 Tyr15以及小鼠卵母细胞减数分裂恢复的影响。利用间接细胞免疫分析技术以及激光共聚焦显微镜观察PIPP和Cdc2 Tyr15在小鼠卵母细胞GV期、GVBD期以及MⅡ的定位以及si PIPP对它们定位的影响;q PCR和Western Blot方法检测PIPP在小鼠卵母细胞GV期、GVBD期以及MⅡ中的表达。结果显示PIPP在小鼠卵母细胞的GV期位于细胞质和膜并以膜为主,而GVBD和MⅡ期主要位于细胞核与膜。si PIPP注射的卵母细胞,减数分裂的恢复过程明显受到抑制;m RNA和蛋白检测结果均显示,PIPPm RNA以及蛋白的表达在GV,GVBD以及MⅡ期的呈现递增趋势。因此我们推论PIPP参与小鼠卵母细胞减数分裂恢复的调控。更多还原