甘丙肽受体激动剂后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制

【作者】 张琪； 费素娟； 张建福；

【机构】 徐州医学院附属医院消化内科；

【摘要】 目的:探讨甘丙肽受体激动剂(M1145)后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用。方法:培养人胃黏膜上皮细胞(GES-1),建立H/R损伤模型。实验分组:常氧对照组(N)、H/R组、溶剂对照组(DM)、M1145后处理组(M)、甘丙肽受体拮抗剂M871+M1145后处理组(M871+M)、辣椒素受体拮抗剂(capsazepine)+M1145处理组(Ca+M)、P38 MAPK信号阻断剂SB203580+M1145后处理组(S+GM)。采用CCK8法检测细胞存活率、流式细胞术检测凋亡率、Hoechst染色观察细胞凋亡形态、分光光度仪检测胞浆乳酸脱氢酶(LDH)含量、实时定量PCR和蛋白印迹法检测胞浆Bcl-2、Bax与p38MAPK表达。结果:1与H/R组(54.1±3.0)%相比,M组细胞存活率明显提高(76.4±4.0)%(P<0.05)、LDH漏出量减少(257.1 IU/L±22.7 IU/L vs 155.9 IU/L±15.4 IU/L)(P<0.05)、阳性凋亡细胞数减少(8±1.7个vs 3±0.8个)(P<0.05)、细胞凋亡率(15.2%±1.8%vs 5.4%±0.6%)降低、Bcl-2 m RNA和p38 MAPK m RNA的相对表达量(分别为0.5±0.06倍vs 0.89±0.12倍和068±0.07倍vs 1.32±0.16倍)增加(P<0.05)、bax m RNA表达量(0.7±0.11倍vs 0.5±0.05倍)降低(P<0.05);2(M871+M)、(Ca+M)、(S+M)组细胞存活率分别为(52±2.3)%、(55±3,4)%、(61.2±4.3)%,均低于M组(76.4±4.0)%(P<0.05)、LDH漏出量增加、阳性凋亡细胞数增多、细胞凋亡率分别为(10.2±1.2)%、(9.4±2.6)%(8.9±0.8)%,均高于M组(5.4±0.6)%、Bcl-2的表达降低,bax表达升高。3与S+M组和H/R组相比,p38 MAPK表达均低于M组(P<0.05)。结论:甘丙肽受体激动剂对人GES-1的H/R损伤具有保护作用;甘丙肽受体和辣椒素受体以及p38MAPK信号通路可能介导了M1145后处理对人GES-1的保护作用。更多还原