银杏酮酯抗心肌再灌注损伤与减少细胞凋亡作用研究

【作者】 包怡敏； 李梅； 刘爱华； 王星禹； 张志雄；

【机构】 上海中医药大学基础医学院生理教研室；

【摘要】 目的:观察银杏叶提取物一银杏酮酯（GBE50）对大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤中血流动力学和心肌细胞凋亡的影响,进一步探讨其抗大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤的机制。方法:32只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,丹参组,GBE50组（n=8）。各组动物分别灌胃CMC-Na蒸馏水溶液,GBE50混悬液或丹参注射液。给药一周后,结扎冠状动脉左前降支30 min、再灌60min建立大鼠心肌缺血再灌注模型。实验过程中持续记录左心室压力,观察I/R过程中血流动力学的改变及药物的作用。实验结束后立即取心肌组织,TUNEL法测定心肌细胞凋亡率,免疫组化测定心肌NF-κB蛋白表达,Real-time PCR和放免法测定心肌TNF-α的mRNA和蛋白表达。结果:GBE50能够明显减轻I/R过程中DP、±dp/dt_max的降低和mLVDP、t-dp/dt_max的增大（P<0.05）,促进心功能的恢复。模型组可见大量细胞核呈凋亡阳性表现;GBE50组与丹参组可见部分胞核呈凋亡阳性表现,心肌细胞凋亡指数明显低于模型组（P<0.05）。免疫组化结果显示,模型组心肌细胞核呈NF-κB强阳性表达,明显高于假手术组（P<0.001）;GBE50组与丹参组NF-κB蛋白表达低于模型组,OD值与模型组比较有显著差异（P<0.05）,阳性面积与模型组有极显著差异（P<0.001）,GBE50组与丹参组之间无差异。模型组心肌TNF-αmRNA和蛋白表达皆显著高于假手术组（P<0.01）;GBE50与丹参能够降低模型动物心肌TNF-αmRNA与蛋白表达（P<0.05）。结论:GBE50有抗心肌缺血再灌注损伤,促进心肌收缩与舒张功能的恢复的作用;这一作用与通过调控NF-κB-TNF-α通路,减少心肌细胞凋亡有关。更多还原