【作者】 李茵； 安文娇； 赵晶； 许戈阳； 张炜真；

【机构】 北京大学医学部基础医学院生理学与病理生理学系；

【摘要】 Ghrelin在机体能量代谢的调节中发挥重要作用。Ghrelin的酰基化对其与受体—生长激素促泌素受体1a(GHSR1a)相结合并发挥生物学作用至关重要。高度特异性催化ghrelin酰基化的酶——ghrelin O-酰基转移酶(GOAT),于2008年被发现,成为干预酰基化ghrelin作用的新靶点。已知GOAT高表达于人的胃和胰腺组织,但在大鼠、小鼠胰腺的表达并不清楚,可能的表达调控因素也知之甚少。本课题以大鼠胰腺和胰岛细胞系(INS-1)为研究对象,利用Western blot、Real-time PCR、基因工程以及GOAT启动子荧光素酶报告基因等检测方法,研究胰岛素对GOAT表达的调控,并探讨其可能的作用机制。结果发现:大鼠胰腺和INS-1细胞系中具有ghrelin和GOAT的表达;胰岛素抑制INS-1细胞GOATmRNA和蛋白水平的表达(P<0.01);胰岛素抑制INS-1细胞GOAT启动子活性(P<0.05);雷帕霉素或过表达TSC1/TSC2可抑制mTOR信号通路,增加INS-1细胞GOAT mRNA和蛋白水平的表达(P<0.01);雷帕霉素或过表达TSC1/TSC2增加INS-1细胞GOAT启动子活性(P<0.01);雷帕霉素或过表达TSC1/TSC2预先阻断INS-1细胞mTOR信号通路后,胰岛素对GOAT表达的抑制作用被反转。本课题首次证实了GOAT在INS-1细胞中的表达,并发现胰岛素可抑制INS-1中GOAT表达,其机制可能与激活mTOR信号通路有关。以上发现为能量代谢尤其是糖代谢中体内激素间的相互调控提供了新的理论依据。更多还原