【作者】 李春英； 朱林燕； 柏志全； 叶文才； 张冬梅； 王立伟； 陈丽新；

【机构】 暨南大学医学院； 暨南大学药学院；

【摘要】 目的:研究23-羟基白桦酸对低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,并从离子通道角度探讨其作用机制。方法:MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡率及细胞周期分布,全细胞膜片钳记录23-羟基白桦酸激活的钾电流。结果:在500nmol/L至80μmol/L浓度范围内,23-羟基白桦酸浓度依赖性抑制CNE-2Z细胞增殖,IC50为9.6μmol/L。流式细胞仪测定结果显示,23-羟基白桦酸处理组的细胞出现凋亡,同时细胞周期分布也发生变化,与对照组相比,G₀/G₁期细胞比例减少,从（66.3±3.2）%减少至（52.4±3.1）%;S期比例增加,从（27.8±1.8）%增加至（41.8±1.9）%（P<0.01）。为了进一步探讨23-羟基白桦酸诱导CNE-2Z凋亡的离子通道机制,了解钾通道在细胞凋亡中的作用,实验观察了23-羟基白桦酸诱导CNE-2Z细胞钾电流的变化。结果发现23-羟基白桦酸显著激活钾通道,40μmol/L23-羟基白桦酸作用于CNE-2Z细胞后,平均钾电流密度从（-3.7±0.7）pA/pF增大到（-16.3±2.8）pA/pF（钳制电压为-92 mV）和（4.6±0.5）pA/pF增大到（43.6±2.9）pA/pF（钳制电压为92 mV）（n=8,P<0.01）,钾电流明显增大。Clotrimazole是中等电导钙依赖性钾通道阻断剂,细胞外灌流100μmol/Lclotrimazole阻断23-羟基白桦酸激活的钾电流。与对照组相比,在钳制电压为-92mV时,clotrimazole对电流平均抑制率为（10.2±2.4）%（n=8,P<0.05）。而在92 mV时,平均抑制率为（52.1±4.7）%（n=8,P<0.01）。Clotrimazole对内向电流和外向电流抑制的差异具有显著性（P<0.01）。细胞外灌流电压依赖性钾通道阻断剂4-aminopyridine（4-AP,5 mmol/L）部分抑制低渗诱发的钾电流,在钳制电压为92mV时,对电流的抑制率为（71.2±4.2）%（n=8,P<0.01）。而在钳制电压-92 mV时,对电流抑制较弱。结论:23-羟基白桦酸可以激活CNE-2Z细胞钾通道,诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期而抑制细胞的增殖,提示钾通道可能参与了23-羟基白桦酸的抗肿瘤作用。更多还原