【作者】 侯志慧； 吴春平； 李东亮；

【机构】 新乡医学院生理学与神经生物学教研室；

【摘要】 目的:探讨大鼠肾上腺嗜铬细胞（rat pheochromocytoma cell line,PC12）氧糖剥夺（oxygen-glucosedeprivation,OGD）后葡萄糖转运体（glucose transporter 3,GLUT3）基因和蛋白的表达情况以及孕酮（progesterone）对其影响。方法:培养PC12细胞,用含50ng/mL神经生长因子的DMEM培养基诱导5天,取生长状态及诱导分化良好的PC12细胞,随机分为三组:（1）正常对照组:PC12在37℃、5%CO₂培养箱中正常培养;（2）氧糖剥夺组:用缺氧液置换正常培养液,将培养板置于95%N₂和5%CO₂持续通气的密闭容器中（37℃）30min造成缺氧,用复氧液置换缺氧液,放入培养箱中培养24 h;（3）孕酮（PROG）组:处理方式同氧糖剥夺组,在缺氧液和复氧液加入终浓度为10nmol/L孕酮。观察氧糖剥夺24h后PC12细胞的活性,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting检测GLUT3 mRNA和GLUT3蛋白的表达情况。结果:OGD组PC12细胞活力OD值（0.600±0.050）明显低于正常对照组（0.986±0.060）（P<0.01）,PROG组细胞活力（0.766±0.031）显著高于OGD组（P<0.01）。与正常对照组（0.602±0.024）相比,OGD组GLUT3 mRNA（0.852±0.07）的表达增加（P<0.01）;与OGD组相比,孕酮组GLUT3 mRNA（1.057±0.089）的表达明显增加（P<0.05）。与正常对照组（0.027±0.0006）相比,OGD组GLUT3蛋白（0.417±0.0006）表达增加（P<0.01）;PROG组GLUT3蛋白（0.056±0.001）表达量明显高于OGD组（P<0.01）。结论:孕酮可能通过上调GLUT3的表达以增加细胞内葡萄糖的转运,提高氧糖剥夺后神经元的能量利用,起到神经保护的作用。更多还原