Hexarelin通过下调LOX-1的表达抑制巨噬细胞向泡沫细胞转化

【作者】 丁帆； 程秀丽； 闫莉； 谷婧丽； 郝维； 高雪； 曹济民；

【机构】 中国医学科学院基础医学研究所； 北京协和医学院基础学院生理学和病理生理学系；

【摘要】 目的我们已发现生长素释放肽hexarelin可抑制动脉粥样硬化,但其机制不甚清楚。该工作探讨清道夫受体LOX-1在hexarelin抑制巨噬细胞向泡沫细胞转化中的可能作用。方法未经处理的RAW264.7巨噬细胞作为正常对照组。由于正常巨噬细胞LOX-1的表达水平很低,因此将TNF-α(10ng·mL~1)诱导5h后的RAW264.7细胞作为LOX-1高表达组(10ng·mL~1 TNF-α)。其它处理包括hexarelin组(TNF-α+10 ~6M hexarelin)与hexarelin受体阻断剂组(TNF-α+Hexsrelin+10-6 M D+Lys-GHRP-6)。上述处理6h候后,加ox-LDL 10μg·mL-1(用于油红O染色)或Dil-ox-LDL(用于流式)过夜。用油红O染色测定巨噬细胞吞噬ox-LDL的量,用Western blot方法检测细胞LOX-1的表达量,用流式细胞术同时检测细胞LOX-1的表达量与细胞内ox-LDL的含量。结果 hexarelin明显抑制RAW264 7细胞吞噬ox-LDL,并降低LOX-1的表达水平;相反,阻断GHS-R后RAW264.7细胞吞噬ox-LDL的量以及LOX-1的表达量明显升高。双标(Dil-oxLDL和FITC-LOX-1)细胞的流式结果表明,细胞吞噬ox-LDL的量与LOX-1的表达水平有明显正相关性;阻断GHS-R后ox-LDL的吞噬量与LOX-1表达水平均升高。结论 hexarelin通过激动其受体GHS-R有效抑制RAW264 7巨噬细胞LOX-1的表达和吞噬ox-LDL,从而抑制泡沫细胞的形成。结果提示,LOX-1可能是GHS-R的下游信号,参与hexarelin抑制动脉粥样硬化的作用。更多还原