小鼠脑动脉平滑肌细胞钙激活钾通道基本特性和动力学调控研究

【作者】 谭晓秋； 刘雪茹； 杨艳； 程俊； 李鹏云； 曾晓荣；

【机构】 泸州医学院医学电生理省部共建教育部重点实验室,心肌电生理学研究室； 泸州医学院附属医院麻醉科；

【摘要】 目的大电导钙激活钾通道(BK_Ca)是血管平滑肌细胞的重要离子通道,携带了70%～80%的外向电流,在调控血管平滑肌张力中起重要作用。而反映BK_Ca通道与胞内钙事情耦连关系的自发性瞬时外向电流（spontaneous transient outward currents,STOCs）在小动脉的肌源性调节中起着非常重要的作用。本文采用穿孔膜片钳技术记录小鼠脑动脉平滑肌细胞上的BK_Ca的宏观电流（macro-current）和STOCs,研究其基本特性,为进一步研究通道功能活动及调控奠定基础。方法采用两步法急性酶分离小鼠脑动脉,得到单个平滑肌细胞。使用200μg/mL两性霉素B为穿孔剂进行穿孔全细胞膜片钳实验,包括全细胞macro-current记录,STOCs记录和单通道记录。结果 BK_Ca macro-current和STOCs能够被BK_Ca的特异性阻断剂IbTX阻断。BK_Ca单通道具有明显电压依赖性、钾离子选择性和钙敏感性,能够被胞外IbTX阻断。胞内钙离子可以明显调控通道动力学特性,主要表现为减少了开放时间常数,促进了通道从关闭向开放状态的转变。结论小鼠脑动脉平滑肌BK_Ca macro-current和STOCs非常容易记录,单通道活性好,具有BK_Ca典型的电生理学特性。可以很好的用于BK_Ca通道功能活动及调控的研究。更多还原