Delta阿片受体激动剂DADLE对心肺复苏后脑损伤保护作用的实验研究

【作者】 高昌俊； 李军平； 汪伟； 吕伯昌； 孙绪德； 柴伟； 李云庆；

【机构】 第四军医大学唐都医院麻醉科； 第四军医大学人体解剖与胚胎学教研室；

【摘要】 目的:窒息性心跳停止(CA)是全脑缺血的一个重要原因,迄今为止仍没有能够有效减少复苏后神经系统并发症的理想的脑保护药物。Delta阿片受体(DOR)在改善脑缺氧、缺血损伤的病理生理过程中发挥着积极的、重要的作用,我们推测DOR在心肺复苏脑损伤过程中同样扮演重要角色。本实验建立大鼠窒息性心肺复苏脑损伤模型,研究侧脑室给予DOR激动剂DADLE(d-Ala2,d-Leu5 enkephalin)对心肺复苏脑损伤的保护作用,并探讨其作用机理。方法:57只健康雄性SD大鼠随机分为四组,即Sham组(n=13)、CA组(n=20)、DADLE组(n=12)和Naltrindole组(n=12)。Sham组大鼠接受麻醉、气管插管和血管穿刺,但不诱导心跳停止(CA)及心肺复苏(CPR),其它三组动物经口行气管插管,夹闭气管导管8min后行机械通气和人工胸外心脏按压,进行心肺复苏。CA组动物在窒息前30min经侧脑室注入人工脑脊液(ACSF)10μl,DADLE组动物在窒息前30min经侧脑室注入含50 nmole DADLE的人工脑脊液10μl,Naltrindole组动物在窒息前30min经侧脑室注入含50 nmole DADLE和50 nmole DOR特异性拮抗剂Naltrindole的人工脑脊液10μl。所有药物均使用微量输注泵,输注时间为60s。实验分为两部分:第一部分,从Sham组和CA组复苏成功的大鼠中分别随机选取5只,在复苏后1h采用Western blot检测海马部位DOR蛋白的表达;第二部分,在复苏后24h,72h和7 d参照Geodadra的神经功能缺损评分(NDS)对存活大鼠进行神经功能评定,评分范围为80分(完全正常)至0分(脑死亡),在复苏后5d、6d、7d和8d对存活大鼠进行Morris水迷宫测试,然后采用Nissl染色观察缺氧敏感的海马CA1区神经元损伤情况。更多还原