棉花nodulin-like基因的功能分析及验证

【作者】 尚慧婕； 张锐； 王远； 孙国清； 孟志刚； 周焘； 郭三堆；

【机构】 中国农业科学院生物技术研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程；

【摘要】 干旱和盐碱对我国棉花产业造成重大影响。本实验室利用同尾酶反向PCR技术从棉花中克隆得到nodulin-like基因,并对其进行了初步的功能分析。瞬时表达表明该基因的表达产物定位在细胞膜上,推测其可能作为膜内在蛋白参与物质运输。用哥伦比亚野生型拟南芥作对照,鉴定转基因拟南芥的耐盐性和抗旱性。结果显示在80mmol·L-1NaCl和100mmol·L-1NaCl的1/2MS平板上转基因拟南芥种子的萌发率和绿苗率均高于野生型;在150mmol·L-1NaCl和15%PEG的1/2MS平板上转基因拟南芥幼苗根伸长量和叶面大小都高于野生型,且转基因拟南芥存活数量高于野生型对照。土壤干旱和200mmol·L-1NaCl浇灌实验中,转基因拟南芥的存活率都高于野生型。在1μmol·L-1ABA的平板上,转基因拟南芥萌发率高于野生型;移植到5μmol·L-1ABA平板上的幼苗,转基因拟南芥生长周期缩短。为了预测Gh nodulin-like可能参与的信号转导途径,进行了抗逆相关基因的实时荧光定量Re-al-Time PCR。首先分析了转基因拟南芥中Gh nodulin-like基因的表达量。发现在L5株系中,Ghnodulin-like的表达量最高。根据以上实验分析,初步推测Gh nodulin-like可能参与不依赖ABA途径的信号转导。更多还原