IL-21通过抑制NKT细胞功能参与慢性HBV感染

【作者】 蒋小滔；

【机构】 南方医科大学基础医学院免疫学教研室；

【摘要】 背景与目的:白介素21(IL-21)可增强CD8+T细胞的功能而在控制慢性病毒感染中发挥关键作用,但其在慢性HBV感染中的研究还极少。我们前期的研究发现慢性乙型肝炎患者外周血IL-21浓度升高而NKT细胞比例下降,机制未明。本研究的目的是探讨IL-21对NKT细胞数量、功能的影响及其在乙肝慢性化中的作用及机制。方法:本研究共纳入15例慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者。采静脉血10-20ml,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),在体外用50ng/mlα-半乳糖神经鞘胺醇(α-Galcer)和不同浓度的重组人IL-21(rh IL-21)刺激PBMC。流式细胞术检测rh IL-21对NKT细胞增殖功能的影响;ELISPOT检测rh IL-21对NKT细胞分泌IFN-γ的影响;用流式免疫磁珠(CBA)法检测培养上清中各种细胞因子的浓度。不同组间的比较用Mann-Whitney U test,同一组不同浓度间的比较用重复测量的方差分析,双侧P<0.05为差异有显著意义。结果:CHB患者外周血NKT在T细胞中的比例为0.19%(0.06%-1.071%);50ng/mlα-Galcer刺激CHB患者PBMC7天后,NKT细胞的比例为0.58%(0.31%-1.86%,显著高于未刺激组(P<0.01);100ng/ml rh IL-21与α-Galcer联合刺激组NKT细胞的比例为0.18%(0.09%-0.95%),与未刺激组相比无明显差异,但显著低于α-Galcer单独刺激组(P<0.01)。ELISPOT结果显示50ng/mlα-Galcer刺激10小时后,分泌IFN-γ的NKT细胞为55±12个/105 PBMC,而100ng/ml rh IL-21与α-Galcer联合刺激组为16±6个/105 PBMC,显著低于α-Galcer单独刺激组(P<0.05)。CBA结果显示,100ng/ml rh IL-21刺激PBMC 7天后,其上清中IL-10、IL-6和IL-1β的浓度分别为375±145 pg/ml、5600±1500 pg/ml和320±135 pg/ml,均显著高于未刺激组(IL-10,56±10pg/ml,P<0.01;IL-6,1108±250 pg/ml,P<0.01;IL-1β,45±8pg/ml,P<0.01);10 ng/ml rh IL-21刺激组与未刺激组相比无明显差异。结论:IL-21能抑制CHB患者外周血中NKT细胞的增值和IFN-γ的分泌,而这种抑制作用可能与IL-21刺激PBMC产生的大量细胞因子相关。更多还原