人重组PDCD5蛋白作为乳腺癌化疗增敏药物的体内外研究

【作者】 王兰兰； 王昌军； 马壮； 罗阳； 那达翔； 马大龙； 王露；

【机构】 北京大学人类疾病基因研究中心； 卫生部医学免疫学重点实验室；

【摘要】 研究背景:乳腺癌是一种严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一。应用抗肿瘤药物紫杉醇进行化学药物治疗是其治疗方法之一。但紫杉醇的细胞毒性副作用及化疗耐药严重影响了化疗的治疗效果。因此,如何有效增强化疗药对肿瘤细胞的杀伤能力而不增加对正常组织的毒性成为提高化疗药物疗效的一个关键问题。人程序性细胞死亡分子5(PDCD5,programmed cell death 5),在多种人类组织和细胞系中广泛表达,且在多数肿瘤组织的表达明显降低,其中包括乳腺癌。更重要的是重组人PDCD5(rh PDCD5)蛋白可促进多种细胞凋亡。目前,已有研究证实rh PDCD5蛋白可以对顺铂治疗软骨肉瘤和柔红霉素治疗白血病起到增敏作用,尚无关于rh PDCD5蛋白对紫杉醇在治疗乳腺癌过程中增敏作用的研究报道。研究目的:研究rh PDCD5作为化疗新的增敏剂对乳腺癌细胞MDA-MB-231的体内外化疗增敏作用。研究方法:Western blot检测MDA-MB-231细胞经过不同浓度紫杉醇和不同时间处理后内源性PDCD5的表达水平。MDA-MB-231细胞经过单独紫杉醇、单独rh PDCD5及两者联合处理后,CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖。体内实验利用裸鼠移植瘤模型,在裸鼠单侧腋下注射MDA-MB-231细胞3×106/100μl,大约7~10天后,腋下瘤体积达到50~80mm3时,开始腹腔注射给予单独紫杉醇(15ng/m L)、单独rh PDCD5(10、20、40 mg/kg)及紫杉醇联合rh PDCD5治疗。研究结果:MDA-MB-231细胞经过紫杉醇不同浓度和不同时间处理后,内源性PDCD5蛋白表达上调,并且呈剂量和时间依赖性。CCK-8和克隆形成实验结果表明单独rh PDCD5(20、40、80μg/ml)对细胞的增殖无任何影响,但在紫杉醇存在时,rh PDCD5蛋白能显著促进化疗药物对乳腺癌细胞MDA-MB-231诱导的细胞生长抑制,且呈浓度依赖性。体内实验结果显示,单独rh PDCD5蛋白对MDA-MB-231细胞移植瘤体积无影响,单独紫杉醇10 mg/kg治疗的肿瘤抑制率为42.3%,紫杉醇联合40 mg/kg rhP DCD5蛋白的肿瘤抑制率达81.7%,可见紫杉醇联合rhP DCD5蛋白的抑瘤效果明显增强,并且Ki-67的表达水平明显降低。结论:rh PDCD5在体内外均可增加MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性,这为其作为乳腺癌治疗的化疗增敏剂提供了重要的依据。更多还原