鳗弧菌M3株Ⅵ型分泌系统的特征

【作者】 莫照兰； 郝斌； 肖鹏； 李贵阳； 李杰；

【机构】 中国水产科学院黄海水产研究所； 中国科学院海洋研究所； 中国科学院北京微生物研究所；

【摘要】 Ⅵ型分泌系统(Type VI secretion system,T6SS)是最近发现的细菌分泌系统,已发现T6SS具有多种功能,包括:增强病原菌的致病性、减弱细胞内共生病原菌的致病性、介导细菌间的相互作用、增强细菌环境的适应性。鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖病害中常见的细菌病原,可感染鱼、虾、贝等多种水产动物,引起出血性败血症而导致养殖动物死亡,对养殖业造成重大经济损失。鳗弧菌M3为本实验室从牙鲆分离得到,已证实其对大菱鲆、舌鳎、大西洋鲑、真鲷、鲈鱼等有致病性。鳗弧菌M3 T6SS的功能尚未明确。我们的研究发现,M3 T6SS基因簇由15个基因组成,在T6SS上游有一个弱启动子,形成一个操纵子结构。建立了7个T6SS基因的缺失突变株,发现突变株在正常培养条件下的生长没有显著性影响,但在限铁条件下的生长、运动力以及菌膜形成都明显减弱,胞外金属蛋白酶EmpA和PrtV的表达降低,但对M3的毒力没有显著影响。免疫共沉淀实验结果显示,T6SS脂蛋白VAA113与两个跨膜蛋白VAA115、VAA120存在相互作用,表明VAA113与VAA115、VAA120三者相互作用形成T6SS输送通道。在M3细胞内外未检测到T6SS基质蛋白Hcp的表达和分泌,而其它一些鳗弧菌则能检测到Hcp的表达和分泌。进一步检测发现,M3 T6SS的表达很低。我们推测M3 T6SS的功能处于未激活状态,某种抑制因子抑制T6SS的表达和分泌。进一步工作将鉴定抑制M3 T6SS表达的抑制因子,进一步阐明鳗弧菌T6SS的功能。更多还原