VP7蛋白在草鱼呼肠孤病毒的检测和预防上的研究进展

【作者】 袁丽； 罗绍祥； 张凤； 陈丛林； 李成鹏； 张晓华； 方勤； 戴和平；

【机构】 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室； 中国科学院大学； 中国科学院武汉病毒所病毒国家重点实验室；

【摘要】 草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)是致病性最强的水生病毒之一,它能引起我国的主要淡水养殖品种草鱼在一龄鱼阶段发生出血病,致死率高达90%,给我国的水产养殖业造成了巨大的损失。本实验室针对GCRV的外壳蛋白VP5和VP7开展了一系列的研究工作,在对该病毒的检测和防治等方面取得了良好进展。本研究利用原核表达的VP5和VP7蛋白作为靶蛋白从噬菌体展示天然单链抗体库中筛选到一系列单链抗体,但只有针对VP7的单链抗体能够特异性识别完整的天然病毒,揭示VP7是更位于病毒表面的蛋白,与其结合的单链抗体作为检测工具更能有效地应用于对病毒的检测上。利用抗草鱼IgM的单链抗体分析GCRV的免疫原性的研究结果表明VP7相对于该病毒的其他结构蛋白在草鱼中能产生更强的免疫反应,提示VP7是用于疫苗设计的首选抗原。因此本研究将VP7蛋白展示于酵母表面做成酵母表面展示疫苗,该疫苗在小鼠免疫实验中表现出良好的免疫效果,对草鱼的免疫实验正在进行中。注射和浸泡是现阶段鱼类免疫的主要方式,其操作复杂,对鱼体伤害较大。而酵母展示的外源蛋白相对稳定,而且酵母是环境友好型微生物,因此该酵母展示疫苗有望制备成口服疫苗,以投喂的方式直接对鱼体进行免疫,使免疫接种程序大为简化,从而更方便快捷地对草鱼出血病起到预防作用。更多还原