鲤鱼JAK基因的克隆及其组织表达分析

【作者】 吴平； 高谦； 刘德立； 付友； 聂品；

【机构】 中国科学院水生生物研究所； 华中师范大学生命科学学院； 南昌大学生命科学与食品工程学院；

【摘要】 两面神激酶(JAK,Janus kinase)是一类酪氨酸蛋白激酶,迄今已发现有四个成员,即JAK-3和TyK2,既能催化与之相连的受体发生酪氨酸残基磷酸化,也能磷酸化多种含有Srv同源区2(SH2)结构域的信号分子。细胞因子受体与相应配基结合后,JAK发生交互酪氨酸磷酸化而激活,活化的JAK催化受体特定部位的酪氨酸磷酸化,形成信号转导和转录激活因子(Signal Transducer and Activator of Transcription,STAT)等含SH2结构域的信号分子的停泊位点,所募集的STAT等信号分子也受JAK激活而发生酪氨酸磷酸化,活化的信号分子进而参与后续的信号转导过程。本研究通过同源克隆方法,利用PCR和RACE-PCR技术克隆得到鲤鱼JAK2和TyK2的cDNA全长序列,并运用实时荧光定量PCR分析鲤鱼JAK2和TyK2基因在各组织中的转录水平。鲤鱼JAK2和TyK2基因开放阅读框(ORF)长度分别为3339 bp和3489 bp。推断分别编码1112和1162个氨基酸,与斑马鱼相应序列的相似性分别为88%和84%。SMART工具软件预测分析显示,鲤鱼JAK2和TyK2均具有N端保守区、JAK保守区B41、SH2和酪氨酸激酶区。实时荧光定量PCR结果表明JAK2和TyK2基因的mRNA表达均具有较为明显的组织差异性,进一步的分析以及这两个蛋白的原核表达正在进行之中。更多还原