草鱼TICAM-1基因对GCRV免疫应答的作用初探

【作者】 杨春荣； 李青梅； 苏建国；

【机构】 西北农林科技大学动物科技学院水产科学系；

【摘要】 TICAM-1(Toll/interleukin-1 receptor domain containing adapter molecule)是TLR3、TLR22的接头分子。在本研究中,首先克隆得到草鱼(Ctenopharyngodon idella)全长的TICAM-1基因组序列(CiTICAM-1,3534 bp),包含496 bp的5’侧翼序列和1个815 bp的内含子。翻译的氨基酸序列具有TIR结构域,与斑马鱼TICAM-1的同源性最高(64%),表现出较大差异。草鱼TICAM-1基因的启动子区域预测,其启动活性被验证。在被检测的15种组织中都有表达,其中在前肠和皮肤等免疫屏障中表达较高。草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)感染后,脾脏和头肾中的表达快速而显著的被诱导。在GCRV感染或poly(I:C)刺激后,草鱼肾细胞系CIK中的表达显著而温和的被诱导。为了进一步深入研究其功能,构建了CiTICAM-1过表达载体,转染CIK细胞,获得稳定表达的细胞。在转染TICAM-1的细胞中,TICAM-1、RIG-I、IRF7及IFN-I的表达都升高,GCRV感染后,这些基因的表达快速而强烈上升后略有下降。在TICAM-1过表达的细胞中,GCRV感染后病毒滴度和病毒量都显著低于对照组。这些结果表明,草鱼TICAM-1在调控抗病毒先天性免疫应答中发挥着重要作用。更多还原