小鼠Miwi基因表达的甲基化调控

【作者】 侯宇； 袁佳； 周详； 周芳； 赵炜； 程汉华； 周荣家；

【机构】 武汉大学生命科学学院遗传学系；

【摘要】 小鼠Miwi基因属于Argonaute基因家族Piwi基因亚家族的一员,2001年由SatomiKuramochi-Miyagawa等人克隆。研究发现Miwi只在小鼠睾丸组织中有表达,且只表达于从粗线期中期到圆形精子细胞时期的生殖细胞中。最近的研究发现Miwi能与一类新发现的、在小鼠雄性性腺中特异表达的小分子RNA(piRNA)相互作用,并参与转座子转录活性的调控,维持精子发生过程中基因组的稳定等重要功能。本实验主要围绕启动子甲基化状态与Miwi基因表达的关系展开研究。运用"MethPrimer"软件对Miwi基因启动子区进行分析,预测到3个CpG岛;分离不同时期的生精细胞包括细线期精母细胞、细线期精母细胞、圆形精子细胞和附睾精子;同时分离睾丸支持细胞,肝脏组织。通过亚硫酸氢盐测序PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP),分别检测不同组织、不同细胞类型Miwi基因启动子区3个CpG岛的甲基化状况,结果显示:在肝脏组织、细线期精母细胞、支持细胞和附睾精子中Miwi基因启动子区CpG岛高度甲基化,而在粗线期精母细胞、圆形精子细胞Miwi基因启动子区CpG岛去甲基化。结果表明Miwi基因启动子区CpG岛的甲基化状况与其表达呈现明显的负相关,提示Miwi基因启动子区CpG岛的甲基化可能参与了Miwi基因组织特异性表达的调控。进一步的研究正在进行中。更多还原